多菌灵人工抗原的合成及多克隆抗体的制备
作者机构:北华大学医学技术学院
出 版 物:《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)
年 卷 期:2023年
学科分类:100208[医学-临床检验诊断学] 1002[医学-临床医学] 10[医学]
基 金:北华大学医学技术学院“迈瑞”科研创新项目(20210010) 北华大学研究生创新计划项目资助(北华研创合字064)
摘 要:目的 合成多菌灵人工抗原,制备多菌灵多克隆抗体并鉴定其特性。方法利用混合酸酐法引入羧基制备多菌灵半抗原。将小分子半抗原与大分子载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成多菌灵人工抗原和包被抗原,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对人工抗原进行鉴定。用制备的人工抗原免疫小鼠获得抗多菌灵多克隆抗体,利用间接ELISA对抗体效价以及特异性进行测定。结果 成功制备多菌灵人工抗原。免疫小鼠后获得的抗体效价可达1:12800。抗体对多菌灵的半数抑制剂量(IC50)为0.107μg/mL,且与苯菌灵、噻菌灵的交叉反应率均1%。结论 成功获得高敏感性、高特异性的多克隆抗体,为多菌灵残留快速检测方法的建立奠定了基础。