弱酸环境下食管内皮细胞活力与分泌因子的变化

作     者：林逊汀 欧阳慧 黄明城 林玉妹 谢晨曦 LIN Xunting;OUYANG Hui;HUANG Mingcheng;LIN Yumei;XIE Chenxi

作者机构：厦门大学附属中山医院消化内科福建厦门361004 中山大学附属第七医院消化内科广东深圳518107 中山大学附属第七医院肾内科广东深圳518107 

出 版 物：《广州医药》 (Guangzhou Medical Journal)

年 卷 期：2023年第54卷第10期

页      面：20-27页

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：福建省自然科学基金项目(面上)(2020J011205) 厦门市医疗卫生指导性项目(3502Z20214ZD1054)。 

主　　题：弱酸 细胞活力 p38 炎症因子 

摘      要：目的采用体外试验的方法,研究弱酸性培养对人正常食管内皮细胞(HEEC)活力的影响及潜在的调控机制。方法细胞培养液的pH值分别设为(6.0~6.5)和(7.0~7.4)。以中性培养组为对照。利用CCK8实验,检测弱酸培养条件下,不同时间点食管内皮细胞活力的变化。采用蛋白免疫印迹法检测p38和磷酸化p38(p-p38)的表达。利用酶联免疫吸附剂测定法检测培养基上清液中IL-1β和IL-8的表达水平,并检测加入p38激酶活性抑制剂SBS 203580后两者浓度的变化。结果弱酸环境下,细胞活力下降。培养1 h时,弱酸组细胞活力为(96.4±8.0)%,培养3 h和6 h时分别为(88.7±6.2)%和(87.7±7.4)%。细胞中p38的水平与培养基的pH值无关。弱酸培养可以促使细胞内p-p38的含量增加。基线时,弱酸组p-p38的灰度值比值为(0.37±0.02),在培养2 h和6 h时分别为(0.64±0.09)、(0.84±0.11),差异显著(P0.01)。弱酸刺激诱导食管内皮细胞表达更多的IL-8和IL-1β。基线时弱酸组上清液中IL-8和IL-1β的浓度分别为(8.64±1.31)pg/mL,(3.35±0.49)pg/mL。培养6 h后,二者的浓度分别上升至(36.85±2.02)pg/mL和(19.19±1.60)pg/mL,差异显著(P0.01)。加入SBS 203580后,IL-8和IL-1β的浓度明显下降(P0.05)。结论弱酸刺激可以降低食管内皮细胞的活力。p38 MAPK可能通过调控IL-8和IL-1β的表达参与该调节过程。