SAPCD2对肺腺癌A549细胞生物学功能的影响及机制研究

作     者：赵哲 穆培娟 张冬 ZHAO Zhe;MU Peijuan;ZHANG Dong

作者机构：内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科内蒙古包头014010 内蒙古科技大学包头医学院内蒙古包头014040 

出 版 物：《中国呼吸与危重监护杂志》 (Chinese Journal of Respiratory and Critical Care Medicine)

年 卷 期：2023年第22卷第7期

页      面：506-514页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：包头医学院青年科技人才发展计划(BYJJ-DXX 2022025)。 

主　　题：SAPCD2 肺腺癌 增殖 迁移 侵袭 Hippo信号通路 

摘      要：目的探讨SAPCD2在肺腺癌细胞中的表达情况,研究SAPCD2调控Hippo信号通路影响肺腺癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响及其机制研究。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)分别检测4种肺癌细胞(HCC827、H1650、SK-MES-1、A549)及人正常肺上皮细胞(BESA-2B)中SAPCD2 mRNA和蛋白质表达水平,然后从中选取SAPCD2表达量相对较高的肺癌细胞来进行后续实验。实验分为正常对照组(NC组)、si-SAPCD2组和通路抑制剂组(si-SAPCD2+XMU-MP-1组)。通过干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)技术沉默SAPCD2 mRNA,采用qRT-PCR法检测转染后肺癌细胞SAPCD2的表达,采用克隆平板实验检测沉默后肺癌细胞的增殖情况,采用流式细胞术检测沉默后的肺癌细胞的凋亡情况,再通过细胞周期实验观察肺癌细胞在不同时期细胞数量,采用Transwell实验分析沉默SAPCD2对肺癌细胞迁移及侵袭的影响,采用Western blot检测ki-67、Bcl-2、Caspase-3、NF2、P-MST1、P-LATS1、P-YAP、YAP、TAZ蛋白表达。结果SAPCD2在肺腺癌A549细胞中表达水平最高(P0.01)。沉默SAPCD2后A549细胞的增殖能力明显下降(P0.01),抑制了A549细胞的迁移(P0.05)及侵袭(P0.01),促进A549细胞凋亡(P0.01);超过半数的细胞停留在G0/G1期,与NC组相比,A549细胞在G0/G1期的细胞明显增多(P0.01),G2/M期及S期的细胞明显减少(P0.01),早期凋亡的细胞比例明显增加(P0.01)。Western blot结果显示沉默SAPCD2后与NC组相比会下调ki-67、Bcl-2、YAP、TAZ蛋白的表达(P0.01),上调Caspase-3、NF2、P-MST1、P-LATS1、P-YAP蛋白的表达(P0.01)。结论SAPCD2在肺腺癌A549细胞的表达较正常肺上皮细胞BESA-2B明显升高,促进A549细胞增殖、迁移及侵袭,抑制细胞凋亡,其机制可能与Hippo信号通路被抑制有关。