血管内皮生长因子mRNA干扰提高胶质母细胞瘤U251细胞对放化疗敏感性的研究

作     者：俞洋 宗祥云 冯建国 吴斌 YU Yang;ZONG Xiang-yun;FENG Jian-guo;WU Bin

作者机构：浙江省肿瘤医院脑外科杭州310022 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2013年第30卷第4期

页      面：718-721页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：胶质母细胞瘤 血管内皮生长因子 RNA干扰 放射治疗 化学治疗 

摘      要：目的探讨血管内皮生长因子（VEGF） mRNA干扰对胶质母细胞瘤的治疗意义。方-法应用RNA干扰技术，对胶质母细胞瘤细胞株U251进行了 VEGF mRNA干扰、辅以6 Gy的放射剂量照射、化疗处理。在干扰前后用流式细胞技术、噻唑蓝（MTT）比色法及倒置显微镜观察等技术对U251细胞株的细胞周期、凋亡率、抑制率、细胞形态进行检测。结果胶质母细胞瘤U251细胞在转染VEGF小干扰RNA（siRNA）后，逆转录-聚合酶链反应（HT-PCR）检测发现VEGF mRNA的表达显著下降，均数下调大于60% ;流式细胞技术显示，U251转染VEGF siRNA后细胞出现G0-G1阻滞，G2 ＋M期细胞数目减少，转染细胞出现不同程度凋亡;MTT比色法可见，转染前不同浓度的紫杉醇对U251细胞有一定的抑制，作用48 h半数抑制剂量（IC50）=28. 1g/L0干扰后，紫杉醇在不同浓度对U251细胞的抑制率都有大幅度的提高，IC50=0. 02 g/L;集落形成抑制实验中，单药物组与单放疗组在克隆形成率上差异无统计学意义（p〉0.05） ,U251细胞转染VEGF siRNA后，明显抑制肿瘤细胞的集落形成，并对紫杉醇及放射治疗具有明显的协同作用;细胞学形态变化观察发现，转染后实验组的细胞形态明显差于未转染组细胞。结论VEGF基因干扰可以抑制U251细胞的增殖、促进其凋亡，并能提高U251细胞对放化疗的敏感性。脂质体紫杉醇在细胞实验中表现出较好的抑制肿瘤作用及对VEGF基因干扰和放疗的协同作用。