热应激对猪睾丸Spo11表达与定位及其诱导DNA双链断裂的影响

作     者：李东晓 李佳容 赵子惠 常倩雯 白涛 范小瑞 贺俊平 LI Dong-xiao;LI Jia-rong;ZHAO Zi-hui;CHANG Qian-wen;BAI Tao;FAN Xiao-rui;HE Jun-ping

作者机构：山西农业大学动物医学学院山西太谷030801 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2023年第53卷第9期

页      面：1200-1206页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(31470124) 山西省优秀博士来晋工作奖励资金科研项目(SXBYKY2022067)。 

主　　题：Spo11 DNA双链断裂 Rad51 γH2AX 热应激 猪 

摘      要：为探究热应激对猪睾丸Spo11、DNA双链断裂分子标记γH2AX和DNA重组修复分子标记Rad51表达和定位的影响,笔者构建了环境热应激(37℃环境温度,每日加热3 h,连续7 d)和睾丸局部热应激(42℃,局部阴囊加热1 h)的猪动物模型,未处理组猪睾丸作为对照。通过免疫组织化学染色、Western-blot和qRT-PCR等方法检测Spo11、Rad51和γH2AX在猪睾丸中的表达和定位。免疫组化结果显示,对照组生精小管内可见各级生精细胞,Spo11和Rad51主要定位于初级精母细胞的细胞核,γH2AX免疫阳性染色见于初级精母细胞的细胞核。与对照组相比,环境热应激组初级精母细胞的细胞核Spo11和γH2AX免疫阳性着色无明显差异,Rad51免疫阳性着色较弱;局部热应激组初级精母细胞的细胞核Spo11、Rad51和γH2AX免疫阳性着色较强,细胞定位未发生变化。Western-blot和qRT-PCR结果显示,与对照组相比,环境热应激组Spo11蛋白、m RNA和γH2AX蛋白水平均无显著差异,Rad51蛋白和m RNA表达水平均显著降低(P0.01);局部热应激组Spo11蛋白和m RNA表达水平均显著增加(P0.05),Rad51蛋白、m RNA和γH2AX蛋白表达水平均显著降低(P0.01)。结果表明,环境热应激对睾丸Spo11和γH2AX蛋白表达水平无显著影响,下调Rad51表达水平,提示DNA双链断裂后修复受损;局部热应激上调初级精母细胞Spo11、Rad51和γH2AX表达水平,提示DNA双链断裂增加。