白念珠菌 HGT 19基因敲除株的构建与基因功能初步研究

作     者：陈婷 黄孝天 张陆兵 CHEN Ting;HUANG Xiao-tian;ZHANG Lu-bing

作者机构：江西省职业病防治研究院南昌330006 南昌大学医学部微生物学教研室南昌330006 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2023年第39卷第9期

页      面：843-849页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主　　题：白念珠菌 基因敲除 生物被膜 锌离子 毒力 

摘      要：目的构建白念珠菌HGT 19基因敲除株,并进行初步的基因功能研究。方法利用同源重组的原理,采用LEU2、HIS1和ARG4营养筛选策略,选用乙酸锂法转化白念珠菌,同时替换白念珠菌原基因组的两条链,得到HGT 19敲除菌(HGT 19Δ/Δ)。利用敲除菌与野生型对照开展一系列表型研究,初步探索HGT 19在白念珠菌中的功能。结果经过PCR和营养型鉴定,成功获得HGT 19敲除株。点板实验表明HGT 19Δ/Δ与野生型相比,HGT 19Δ/Δ对Zn^(2+)与细胞膜损伤剂SDS(十二烷基硫酸钠)敏感,对其他大部分金属离子(Na^(+)、K^(+)、Li^(+)、Ca^(2+)、Fe^(2+)、Fe^(3+)、Cu^(2+))无明显差异。生物膜实验表明HGT 19Δ/Δ生物膜与野生型相比有缺陷。小鼠的生存实验表明,HGT 19Δ/Δ组与野生型组相比,可减缓小鼠的死亡。结论敲除HGT 19基因后,白念珠菌对锌离子敏感,形成生物膜能力明显减弱,毒力明显减弱。