miR-22-3p靶向调控PLAGL2保护OGD/R诱导的心肌细胞损伤机制研究

作     者：陈玥璇 汪潞 柳华锋 CHEN Yuexuan;WANG Lu;LIU Huafeng

作者机构：杭州市中医院急诊科浙江杭州310007 

出 版 物：《全科医学临床与教育》 (Clinical Education of General Practice)

年 卷 期：2023年第21卷第9期

页      面：784-789页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主　　题：miR-22-3p PLAGL2 OGD/R 心肌细胞 铁死亡 

摘      要：目的探讨miR-22-3p在氧-糖剥夺/复氧(OGD/R)心肌细胞铁死亡中的作用及机制。方法大鼠心肌细胞系H9c2采用OGD/R处理以及转染miR-22-3p模拟物(miR-22-3p mimic)。细胞根据是否缺氧及有无转染分为常氧组、OGD/R组、OGD/R+miRNA模拟物阴性对照(miRNA-NC组)和OGD/R+miR-22-3p组。采用细胞计数(CCK-8)法检测细胞活力,酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测H9c2细胞中铁死亡指标水平,Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)及多形性腺瘤基因样蛋白2(PLAGL2)蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证miR-22-3p和PLAGL2靶向关系。结果OGD/R处理H9c2细胞后,第4天的吸光度值低于常氧组,活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)水平、Fe^(2+)的积累明显高于常氧组,miR-22-3p水平明显低于常氧组(t分别=3.78、4.24、2.54、4.47、3.53,P均0.05),H9c2细胞转染miR-22-3p mimic及OGD/R处理后,第3、4天的吸光度值高于miR-NC+OGD/R组(t分别=2.98、1.97、2.57、2.46,P均0.05),细胞MDA、ROS、Fe^(2+)明显低于OGD/R+miR-NC组(t分别=2.62、5.35、4.11,P均0.05),Gpx4表达水平高于OGD/R+miR-NC组。Fer-1和OGD/R处理H9c2细胞后,第3、4天的细胞吸光度值明显高于OGD/R组(t分别=3.12、3.36,P均0.05),细胞MDA、ROS和Fe^(2+)水平显著低于OGD/R组(t分别=3.03、5.33、2.48,P均0.05)。H9c2细胞转染miR-22-3p组的PLAGL2蛋白表达明显低于miR-NC组,且PLAGL2-WT+miR-22-3p组的荧光素酶活性明显低于PLAGL2-MUT+miR-22-3p组(t=2.69,P0.05)。H9c2细胞共转染miR-22-3p mimic和PLAGL2过表达质粒后,Gpx4表达低于OGD/R+miR-22-3p组,吸光度值明显低于OGD/R+miR-22-3p组(t分别=3.91、3.12,P均0.05),MDA、Fe^(2+)、ROS水平高于OGD/R+miR-22-3p组(t分别=3.78、3.87、3.05,P均0.05)。结论miR-22-3p靶向调控PLAGL2表达抑制铁死亡,进而降低OGD/R诱导的心肌细胞损伤。