PRNP过表达MAC-T细胞的构建及其对细胞黏附侵袭的影响

作     者：张钊 颜丽娇 杨宇泽 苟惠天 万学瑞 马小军 丁巨财 彭婕 王川 张小丽 ZHANG Zhao;YAN Lijiao;YANG Yuze;GOU Huitian;WAN Xuerui;MA Xiaojun;DING Jucai;PENG Jie;WANG Chuan;ZHANG Xiaoli

作者机构：甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 北京市畜牧总局北京100107 

出 版 物：《甘肃农业大学学报》 (Journal of Gansu Agricultural University)

年 卷 期：2023年第58卷第4期

页      面：37-45页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：甘肃农业大学动物医学院学科建设基金项目(GSAU-XKJS-2018-074) 

主　　题：慢病毒载体 PRNP MAC-T细胞 MRSA 

摘      要：【目的】研究PRNP过表达对牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)黏附、侵袭的影响。【方法】利用慢病毒载体技术构建PRNP慢病毒过表达载体并建立稳定PRNP过表达MAC-T细胞系;应用实时荧光定量PCR和Western Blot对过表达MAC-T细胞系进行验证;随后用MRSA感染MAC-T细胞和PRNP过表达MAC-T细胞系,比较PRNP过表达MAC-T细胞和野生型MAC-T细胞在黏附侵袭生理特性的差异。【结果】成功构建pLVML-PRNP慢病毒表达载体和稳定的PRNP+-MAC-T细胞系;黏附侵袭结果表明MRSA对过表达PRNP的MAC-T细胞黏附侵袭能力显著低于对照组,值得注意的是,MRSA在感染PRNP+-MAC-T细胞后的6 h内,未发生明显的侵袭现象,直至感染6 h后其侵袭率才明显上升,8 h达到峰值,但是仍显著低于MRSA对MAC-T细胞的侵袭率。【结论】PRNP过表达能够降低MRSA对细胞的黏附侵袭能力。