脱醇红酒抑制肝细胞癌的发生和发展:基于诱导细胞周期的阻滞和凋亡

作     者：兰玉 王凯风 蓝智贤 周何琪 孙剑 LAN Yu;WANG Kaifeng;LAN Zhixian;ZHOU Heqi;SUN Jian

作者机构：器官衰竭防治国家重点实验室广东省病毒性肝炎研究重点实验室南方医科大学南方医院感染内科广东广州510515 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2023年第43卷第8期

页      面：1297-1305页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(U22A20274)。 

主　　题：脱醇红酒 肝细胞癌 多酚 RNA-seq 细胞周期 细胞凋亡 

摘      要：目的探讨脱醇红酒对肝细胞癌(HCC)发生发展的抑制作用,并初步探索其可能的机制。方法不同浓度的脱醇红酒(0、5、10、25、50和100μL/mL)处理人肝癌细胞(Huh7,HepG2和SK-Hep-1)后,采用CCK-8和克隆形成实验分别检测各组细胞的增值活性和克隆形成能力。构建裸鼠皮下瘤模型,分为实验组(脱醇红酒,300μL/d)和对照组,干预4周后对比两组肿瘤体积。构建化学诱导小鼠肝癌模型,分为实验组(脱醇红酒,300μL/d)和对照组,干预6周后对比两组肝脏肿瘤数量、最大肿瘤直径和肝体比。脱醇红酒(75μL/mL)处理48 h后,利用RNA-seq对Huh7细胞转录组测序,基因集富集分析(GSEA)观察基因集及通路的变化;流式细胞术检测脱醇红酒(75μL/mL)干预后Huh7细胞周期和凋亡变化。结果在体外,脱醇红酒呈浓度和时间依赖性地抑制肝癌细胞的增殖活性,呈浓度依赖性地抑制其克隆形成能力。在体内,相比于对照组,脱醇红酒显著抑制实验组裸鼠皮下瘤的体积(P0.05),也能显著抑制实验组化学诱导肝癌小鼠的肝脏肿瘤数量(P0.001)、最大肿瘤直径(P0.05)和肝体比(P0.01)。RNA-seq结果显示,脱醇红酒干预后Huh7细胞内有634个基因上调和478个基因下调(|log2FC|≥2,Q≤0.05)。基因集富集分析发现,脱醇红酒能够诱导细胞周期通路相关基因集显著下调(包括E2F Targets、G2M Checkpoint、MYC Targets等)和细胞凋亡通路相关基因集上调;流式细胞检测结果表明,脱醇红酒的干预使Huh7细胞G1期阻滞,同时诱导细胞凋亡。结论脱醇红酒对HCC的发生发展具有抑制作用,其机制可能与细胞周期和凋亡相关通路介导的肝癌细胞G1期阻滞和细胞凋亡有关。