Krüppel样因子7对前列腺癌细胞生物学行为的影响及分子机制
Effect and molecular mechanism of Krüppel-like factor 7 on the biological behavior of castration-resistant prostate cancer cells作者机构:石河子大学医学院医学遗传学教研室新疆石河子832000 石河子市人民医院泌尿外科新疆石河子832003
出 版 物:《中华肿瘤防治杂志》 (Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment)
年 卷 期:2023年第30卷第18期
页 面:1100-1109页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金青年基金(81900707) 国家级大学生创新训练项目(202210759016) 兵团重点领域科技攻关项目(2021AB028) 石河子大学自主资助支持科研创新项目(ZZZC202017A)
主 题:Krüppel样因子7 转化生长因子-α 前列腺癌 增殖 侵袭 迁移
摘 要:目的探讨Krüppel样因子7(KLF7)高表达对去势抵抗性前列腺癌(PCa)细胞增殖、侵袭与迁移的影响及分子机制。方法RNA-seq结合生物信息学方法预测KLF7下游靶基因。收集2017-09-01-2019-09-31在石河子市人民医院住院PCa患者肿瘤组织和前列腺增生(BPH)组织石蜡切片各10例,免疫组化法检测前列腺组织中KLF7及下游靶基因的表达水平。体外培养去势抵抗性PCa细胞系PC-3,分别设置上和下调KLF7组、上和下调下游靶基因组及上调KLF7同时下调下游靶基因组。qRT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞中KLF7及下游靶基因的mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞的侵袭与迁移能力;双荧光素酶报告基因实验检测KLF7对下游靶基因是否具有转录激活作用。结果RNA-seq结合生物信息学预测结果显示,转化生长因子-α(TGF-α)可能是KLF7的下游靶基因。与前列腺组织相比,KLF7(0.89±0.26 vs 2.19±0.45,t=7.989,P0.001)及TGF-α(2.06±0.54 vs 2.60±0.39,t=2.474,P=0.024)在PC-3组织中均高表达。上调(1.00±0.35 vs 2.09±0.08,t=5.345,P=0.006)、下调(1.00±0.17 vs 0.36±0.01,t=6.562,P=0.003)KLF7后TGF-α的mRNA和蛋白表达水平升高和降低;上调KLF7可显著促进PC-3细胞的增殖(72 h:1.73±0.07 vs 1.90±0.02,t=4.269,P=0.013)、侵袭(57.11±18.68 vs 95.78±30.84,t=3.217,P=0.005)与迁移(121.56±33.67 vs 240.11±36.56,t=7.156,P0.001)能力;下调KLF7可显著抑制PC-3细胞的增殖(72 h:2.12±0.07 vs 1.77±0.02,t=8.671,P=0.001)、侵袭(210.00±56.73 vs 87.33±16.90,t=5.888,P0.001)与迁移(208.33±43.44 vs 138.22±33.61,t=3.830,P=0.002)能力;上调TGF-α可显著促进PC-3细胞的增殖(72 h:1.90±0.06 vs 2.39±0.03,t=15.442,P0.001)、侵袭(152.67±8.11 vs 201.22±7.30,t=13.356,P0.001)与迁移(107.00±27.79 vs 163.00±15.80,t=5.255,P0.001)能力;下调TGF-α可显著抑制PC-3细胞的增殖(72 h:2.31±0.07 vs 1.80±0.11,t=6.695,P=0.003)、侵袭(188.44±20.43 vs 108.56±27.96,t=6.922,P0.001)与迁移(192.11±22.18 vs 110.67±30.67,t=6.456,P0.001)能力;上调KLF7同时下调TGF-α后,可逆转KLF7对PC-3细胞增殖(72 h:2.40±0.11 vs 1.87±0.03,t=8.916,P0.001)、侵袭(83.67±18.25 vs 61.56±12.10,t=3.029,P=0.008)和迁移(98.78±11.71 vs 60.67±6.00,t=8.688,P0.001)的促进作用。双荧光素酶报告基因实验结果显示,KLF7对TGF-α无直接转录激活作用(1.00±0.17 vs 1.06±0.06),t=0.704,P=0.508。结论高表达的KLF7可通过上调TGF-α表达,促进去势抵抗性PCa细胞PC-3的增殖、侵袭与迁移能力。