黑松露成分TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立与应用

作     者：杨爱馥 孙赟 万超 刘雪华 邰丽梅 王玫 Yang Aifu;Sun Yun;Wan Chao;Liu Xuehua;Tai Limei;Wang Mei

作者机构：大连海关技术中心辽宁大连116001 中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所昆明650033 

出 版 物：《中国食品学报》 (Journal of Chinese Institute Of Food Science and Technology)

年 卷 期：2023年第23卷第7期

页      面：403-409页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 0903[农学-农业资源与环境] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

基　　金：海关技术规范制(修)订计划项目(2020B160) 海关总署科研项目(2021HK189) 大连海关科研项目(2021DK10,2022DK05)。 

主　　题：黑松露 ITS基因 TaqMan实时荧光PCR 快速检测 

摘      要：以黑松露核糖体内转录间隔区基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立黑松露成分的TaqMan实时荧光PCR检测方法,并进行物种特异性验证。同时对不同掺入比例的模拟样品和市售黑松露及制品进行检测。结果表明:该方法特异性强,仅对黑松露基因组DNA出现特异性扩增曲线,与其它食用菌和异源性动植物样品无非目标扩增;检测灵敏度为1×10-3ng/μL黑松露基因组DNA或质量分数0.01%的黑松露粉。对120份市售黑松露(鲜品、冻品、干品、粉末)、黑松露制品(黑松露酱和黑松露调味粉)以及不含黑松露成分的杂菌包进行检测,在70份黑松露(鲜品、冻品、干品、粉末)和10份黑松露制品中检出黑松露成分,其它样品均未检出黑松露成分,检测结果与商品标识一致。该方法灵敏度高,特异性强,可快速精准地进行黑松露成分的真实性甄别。