金银花提取物对哮喘模型小鼠气道平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

作     者：宋远瑛 阚竞 彭坤 李悦 SONG Yuanying;KAN Jing;PENG Kun;LI Yue

作者机构：湖北中医药大学附属湖北省中医院肺病科湖北武汉430000 湖北中医药大学第一临床学院湖北武汉430065 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2023年第49卷第4期

页      面：1001-1007页

学科分类：1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：湖北省卫健委中医药科研项目青年人才项目(ZY2019Q014)。 

主　　题：哮喘 金银花提取物 气道平滑肌细胞 细胞增殖 细胞凋亡 

摘      要：目的:探讨金银花提取物对哮喘小鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和凋亡的影响,阐明其相关的作用机制。方法:构建小鼠哮喘模型,分离原代ASMCs并进行鉴定。采用白细胞介素4(IL-4)诱导巨噬细胞RAW264.7 M2极化并进行鉴定。RAW264.7细胞分为对照组及低、中和高剂量金银花提取物组,对照组诱导RAW264.7细胞M2极化后与ASMCs共培养,低、中和高剂量金银花提取物组分别用不同浓度(50、100和200 mg·L^(-1))金银花提取物处理RAW264.7细胞1 h,再用60μg·L^(-1)IL-4处理6 h,随后将ASMCs与RAW264.7细胞共培养24 h。流式细胞术检测各组RAW264.7细胞中巨噬细胞表面标记蛋白CD86和CD206阳性细胞百分率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组ASMCs培养上清液中白细胞介素10(IL-10)水平,MTT法检测各组ASMCs增殖活性,流式细胞术检测各组ASMCs凋亡率。结果:细胞形态表现和免疫荧光染色结果证明所提取的细胞为ASMCs。RAW264.7细胞M2极化鉴定结果显示已诱导成为M2巨噬细胞。与对照组比较,低、中和高剂量金银花提取物组RAW264.7细胞中CD86阳性细胞百分率明显升高(P0.05),CD206阳性细胞百分率明显降低(P0.05),ASMCs培养上清液中IL-10水平和ASMCs增殖活性明显降低(P0.05),ASMCs凋亡率明显升高(P0.05);与低剂量金银花提取物组比较,中和高剂量金银花提取物组RAW264.7细胞中CD86阳性细胞百分率明显升高(P0.05),CD206阳性细胞百分率明显降低(P0.05),ASMCs培养上清液中IL-10水平和AMSC增殖活性明显降低(P0.05),ASMCs凋亡率明显升高(P0.05);与中剂量金银花提取物组比较,高剂量金银花提取物组RAW264.7细胞中CD86阳性细胞百分率明显升高(P0.05),CD206阳性细胞百分率明显降低(P0.05),ASMCs培养上清液中IL-10水平和ASMCs增殖活性明显降低(P0.05),ASMCs凋亡率明显升高(P0.05)。结论:金银花提取物可通过抑制巨噬细胞M2极化进而抑制哮喘小鼠ASMCs细胞增殖并促进其凋亡。