沉默ACSL1表达抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的脂肪代谢及增殖和迁移

作     者：叶力 刘红梅 吴佳伟 刘培峰 YE Li;LIU Hongmei;WU Jiawei;LIU Peifeng

作者机构：上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室上海200032 上海交通大学医学院附属仁济医院中心实验室上海200127 上海交通大学医学院附属仁济医院心血管外科上海200127 

出 版 物：《肿瘤》 (Tumor)

年 卷 期：2022年第42卷第2期

页      面：133-143页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(21704061 81771968) 

主　　题：乳腺肿瘤 脂肪酸代谢 长链脂酰辅酶A合成酶1 细胞增殖 细胞运动 

摘      要：目的:研究抑制长链脂酰辅酶A合成酶1(long-chain acyl-CoA synthetase 1,ACSL1)表达对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞脂肪代谢的影响,并探讨其抑制TNBC细胞增殖和迁移等恶性表型的作用。方法:利用癌症基因图谱(e Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库探究并分析ACSL1与乳腺癌预后的相关性,并对比不同乳腺癌亚型中ACSL1表达量的差异。在供给棕榈酸(palmiticacid,PA)的条件下培养TNBC型MDA-MB-231细胞和雌激素受体阳性的乳腺癌MCF-7细胞,并采用ATP生物发光法检测PA对细胞ATP产量的影响,以评估不同亚型乳腺癌细胞对脂肪酸代谢的偏好;同时采用CCK-8法检测PA对细胞活性的影响。为评估抑制ACSL1表达对TNBC型MDA-MB-231细胞脂肪酸代谢的影响,采用慢病毒感染的方法在MDA-MB-231细胞中沉默ACSL1的表达,随后采用蛋白质印迹法检测细胞中脂肪酸代谢相关蛋白ACSL1、肉毒碱棕榈酰转移酶1A(carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)以及白细胞分化抗原CD36的表达水平;采用BODIPY脂肪荧光染色法检测细胞内的脂肪积累情况,采用划痕愈合实验检测细胞的迁移能力,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞的增殖能力。结果:ACSL1高表达的乳腺癌患者的生存率明显低于ACSL1低表达者(P=0.00014),且HER2过表达型和TNBC型患者中ACSL1的表达水平均高于Luminal A和(或)B型患者(P均0.05)。在MDA-MB-231细胞中沉默ACSL1表达后,细胞中脂肪酸代谢相关蛋白ACSL1、CPT1A以及CD36的表达水平下调,细胞内脂滴积累及脂肪含量降低,细胞迁移能力降低(P0.001),细胞增殖能力减弱(P0.05)。结论:ACSL1高表达与乳腺癌的不良预后相关。在各乳腺癌亚型中,TNBC患者具有相对较高的ACSL1表达水平。对于具有脂肪酸代谢偏好的TNBC细胞MDAMB-231,沉默其ACSL1表达可抑制其脂肪酸代谢,并降低其细胞迁移和增殖能力。