剑麻AhKH1775基因克隆及其酵母双杂交诱饵载体构建

作     者：汪询 杨倩 柯智 周文钊 杨子平 吕玲玲 Wang Xun;Yang Qian;Ke Zhi;Zhou Wenzhao;Yang Ziping;LüLingling

作者机构：海南大学园艺学院海口570228 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所湛江市热带作物遗传改良重点实验室湛江524091 怀化学院风景园林学院怀化418099 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2023年第21卷第15期

页      面：4935-4940页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：海南省自然科学基金项目(320MS088,321QN300) 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-16) 广东省自然科学基金项目(2022A1515011841,2021A1515012421)共同资助 

主　　题：剑麻 KH结构域 基因克隆 酵母双杂交 诱饵载体 

摘      要：KH结构域蛋白参与调控植物开花时间、花器官形成、叶发育、miRNA产生和对生物非生物胁迫的响应。前期实验发现AhKH1775可能参与调控剑麻株芽的发育,但是其调控机制仍不清楚。KH结构域蛋白可以通过复合体的方式参与转录后基因表达调控。为获得与AhKH1775相互作用的蛋白,本研究克隆了AhKH1775的完整编码框,构建了酵母双杂交诱饵载体,并检测了诱饵载体的毒性和自激活性。结果显示,克隆获得一个918 bp的编码框,成功构建了诱饵载体,诱饵载体无毒性,但存在自激活性,25 mmol/L的3-AT可以抑制诱饵载体的自激活性。本研究结果为进一步筛选与AhKH1775相互作用的蛋白和深入研究AhKH1775在剑麻中的功能提供依据。