艳山姜挥发油自乳化释药系统的毒性及对Caco-2细胞单层细胞旁转运与P-糖蛋白的影响

作     者：吴朝花 何丽 肖婷 陈英 甘诗泉 沈祥春 陶玲 WU Chao-hua;HE Li;XIAO Ting;CHEN Ying;GAN Shi-quan;SHEN Xiang-chun;TAO Ling

作者机构：贵州医科大学第二附属医院贵州凯里556000 贵州医科大学药学院药用植物功能与应用国家重点实验室贵州省天然药用资源高效利用工程中心贵州贵安新区550025 贵州医科大学药学院药物药理教研室贵州省天然药物药理与可药性高等教育重点实验室贵阳市联合重点实验室天然药物资源优化利用重点实验室贵州贵安新区550025 

出 版 物：《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期：2023年第54卷第11期

页      面：3568-3577页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：贵州省科技厅自然科学计划项目(黔科合基础-ZK一般380,黔科合基础1Y210,黔科合基础-ZK一般303) 贵州医科大学国家自然科学基金培育项目(20NSP053) 贵州医科大学药学国际科技合作基地(黔科合平台人才5802) 贵州省中医药管理局中医药、民族医药科学技术研究课题(QZYY-2021-072) 贵州省卫生健康委科学技术基金项目(gzwkj2022-478)。 

主　　题：艳山姜挥发油 自乳化释药系统 Caco-2细胞 细胞毒性 P-糖蛋白 急性毒性 

摘      要：目的 考察艳山姜挥发油自乳化释药系统(essential oil of Fructus Alpinia zerumbet-self-emulsifying drug delivery system,EOFAZ-SEDDS)的毒性及其对人结直肠腺癌Caco-2细胞单层通透性和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的影响。方法 采用MTT法和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)法测定EOFAZ-SEDDS的细胞毒性;荧光黄渗透率实验考察EOFAZ-SEDDS对Caco-2单层通透性的影响;Western blotting考察EOFAZ-SEDDS对P-gp蛋白表达的影响;流式细胞仪检测EOFAZ-SEDDS对P-gp功能的影响。小鼠ig不同剂量EOFAZ-SEDDS,连续观察14 d,考察EOFAZ-SEDDS对小鼠的急性毒性作用。结果 与EOFAZ组比较,EOFAZ-SEDDS处理培养1、3、5 d的Caco-2细胞24 h后细胞存活率均显著升高(P0.05、0.01),LDH外漏率显著降低(P0.05、0.01)。与对照组比较,EOFAZ-SEDDS、单独的EOFAZ均能够显著增加荧光黄透过率(P0.01);EOFAZ处理Caco-2细胞24 h后,P-gp蛋白表达显著降低(P0.05),EOFAZ-SEDDS处理后P-gp蛋白表达水平显著升高(P0.05、0.01);10、20μg/mL的EOFAZ-SEDDS对P-gp外排功能没有影响,40μg/mL EOFAZSEDDS显著增加细胞内罗丹明的荧光强度(P0.05)。小鼠口服制剂的半数致死剂量(median lethal dose,LD_(50))为5.291 5g/kg,95%置信限为4.927 8~5.682 1 g/kg。根据急性毒性分级标准,EOFAZ-SEDDS对小鼠实际无毒。结论 EOFAZ-SEDDS可以降低EOFAZ的细胞毒性,对小鼠实际无毒,但改变了Caco-2细胞单层屏障功能,同时诱导P-gp表达,在一定浓度范围内对其功能没有影响,为EOFAZ新剂型的研究提供了一定的实验基础。