实时荧光定量PCR测定胸腺近期输出功能方法的建立和应用
Estabitishment and application of real-time fluorescence quantitative PCR for detecting recent thymic output function作者机构:徐州医学院附属医院感染性疾病科徐州 221002
出 版 物:《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)
年 卷 期:2007年第21卷第1期
页 面:73-75页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含:普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学]
基 金:江苏省科委社会发展计划基金资助项目(BS2004014)
主 题:基因重排,T淋巴细胞 胸腺 聚合酶链反应 肝炎,乙型,慢性
摘 要:目的 建立一种准确、快速的检测胸腺输出功能的方法。方法 根据TCRδ基因序列,设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环(TRECs)的方法;并用于检测正常人及慢乙肝PBMCs中TRECs的含量。结果 建立了测定TRECs含量的实时荧光定量PCR方法,产物与预计长度相符,序列正确;最低可扩增出5 copies的模板;重复五次,Ct值的变异系数为1.06%。正常人21-45岁组的TRECs含量为(7767.4±2369.5)copies/10^6 PBMCs,16-20岁组为(28374.4±7820.4)copies/10^6 PBMCs,21-45岁慢乙肝组(6480.9±2031.2)copies/10^6 PBMCs,正常人21-45岁组分别与16-20岁组、同龄慢乙肝组比较差异均有统计学意义,P〈0.05。结论 实时荧光定量PCR检测TRECs的方法特异性强,灵敏度高,重复性好。正常人21-45岁组的胸腺输出功能低于16-21岁组,慢乙肝组低于同龄正常人。