胃癌细胞系SGC7901通过间充质干细胞原纤毛调控钙信号对成骨分化的影响

作     者：陈茜 李梦雪 王吉春 刘杰 许洁 汪长东 CHEN Qian;LI Meng-xue;WANG Ji-chun;LIU Jie;XU Jie;WANG Chang-dong

作者机构：重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 

出 版 物：《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 (Chinese Journal Of Osteoporosis And Bone Mineral Research)

年 卷 期：2023年第16卷第1期

页      面：23-32页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：重庆市渝中区科委科研项目(20200112) 重庆市研究生科研创新项目(CYS19204) 重庆市科委面上项目(CSTB2022NSCQ-MSX0945,cstc2014jcyjA10024) 教育部博士点基金(20125503120015) 重庆市教委(CY170402)。 

主　　题：SGC7901 间充质干细胞 成骨分化 原纤毛 钙信号 

摘      要：目的探究胃癌细胞系SGC7901如何影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化。方法分离SD大鼠乳鼠股骨,获取原代MSCs。将原代MSCs和经血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)处理的原代MSCs分别与胃黏膜细胞系GES-1和胃癌细胞系SGC7901共培养,并以成骨诱导培养基(OS培养基)诱导72 h,提取MSCs总蛋白和总RNA。对总RNA进行RNA-seq检测并对显著差异基因进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和真核直系同源群(euKaryotic Ortholog Groups,KOG)可视化分析;以GAPDH为内参,Western blot检测成骨标志蛋白,钙信号相关蛋白和原纤毛结构相关蛋白表达;对共培养后获取的MSCs总蛋白进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测。结果MSCs原代培养细胞呈多角形或梭形;经过成骨诱导培养基(OS培养基)诱导,茜素红染色矿化结节呈红色;以SGC7901为对照,MSCs细胞高表达CD44,低表达CD34。与GES-1共培养相比,SGC7901共培养的MSCs中骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和Runx2表达均降低(P0.01),ALP酶活力显著降低(P0.001)。SGC7901共培养上调了MSCs中乙酰化α-微管蛋白和γ-微管蛋白表达(P0.01)。RNA-seq分析显著差异基因共3712个,2756个基因表达上调,956个基因表达下调;SGC7901共培养的MSCs中ADRB3和PLN表达均降低(P0.001)。经过AngⅡ处理后,SGC7901共培养抑制的Runx2和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达水平增加(P0.05),ALP酶活力增强(P0.001)。结论胃癌细胞SGC7901通过促进MSCs原纤毛生长,抑制钙信号从而抑制MSCs成骨分化。