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Integrinβ1 asODN-inhibition of Cell Attachment and Invasion of the Human Gastric Cancer Cell Une sgc7901

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Chinese Journal of Clinical Oncology 2005年第1期2卷 496-499,504页

作者： WuDong YuehongCui HuimianXu DepartmentofOncology FirstHospitalChinaMedicalUniversityShenyang110001China DepartmentofChemotherapy TreatmentCenterZhongshanHospitalaffiliatedwithFudanUniversityShanghai200052China

OBJECTIVE To study the inhibition of adhesion and invasion of sgc7901 cells into the ECM by integrinβ1 antisense oligodeoxynucleotide *** asODN and control ODN were transfected into sgc7901 cells using liposomes as vectors. The distribution of the ODN was followed by immunochemistry and changes in the expression of integrinβ1 mRNA and protein were determined by RT-PCR and FCM, respectively. The adhesion and invasion into the ECM were measured by the MTT and Boyden chamber methods, *** Integrinβ1 asODN which was transfected into sgc7901 cells distributed evenly in the cytoplasm and nucleus. PCR and FCM revealed a weakened band at 489bp and a left-shift curve, respectively. Adhesion and invasion assays showed decreased activity with an inhibition rate of 54% and 76%. The extent of decrease induced by integrinβ1 asODN was larger than that caused by random control ODN (Psgc7901 cells induced a decrease in the expression of integrinβ1 mRNA and protein,resulting in a decrease in adhesion and invasion into the ECM, with a greater effect than random control ODN.

关键词：整合蛋白β1 细胞功能胃癌 sgc7901 肿瘤细胞

Antisense expression of PKCα improved sensitivity of sgc7901/VCR cells to doxorubicin

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World Journal of Gastroenterology 2009年第10期15卷 1259-1263页

作者： Da-Long Wu Feng-Ying Sui Cheng Du Cheng-Wen Zhang Bin Hui Shui-Ling Xu Huan-Zhang Lu Guo-Jie Song Department of Pharmacology School of MedicineJiaxing College Jiaxing 314001 Zhejiang Province China Traditional Chinese Medicine Hospital of JiaxingCity Jiaxing 314001 Zhejiang Province China Department of Microbiology School of MedicineJiaxing College Jiaxing 314001 Zhejiang Province China Department of Clinical Pharmacology Affiliated Hospital Chinese Academy of Military MedicalSciences Beijing 100039 China

AIM:To explore whether antisense blocking of protein kinase C alpha(PKCα)would reverse multi-drug resistance(MDR)in the vincristine(VCR)-resistant human gastric cancer cell line sgc7901/VCR. METHODS:sgc7901/VCR cells expressing antisense PKCα,sgc7901/VCR/aPKC,were established by transfection with a recombinant plasmid reversely inserted with PKCα*** vector(PCI-neo)transfected cell clones,sgc7901/VCR/neo,served as the *** blot method was used to detect PKCαcontent in sgc7901,sgc7901/VCR,sgc7901/ VCR/neo and sgc7901/VCR/aPKC cells,using PKCα-specific *** sensitivity of sgc7901,sgc7901/ VCR,sgc7901/VCR/neo and sgc7901/VCR/aPKC cells to doxorubicin(DOX)in vitro was determined by MTT *** uptake of DOX in these cells was detected with fluorescence ***:Western blot analysis showed that the PKCαprotein level was about 8.7-fold higher in sgc7901/ VCR cells than that in sgc7901 cells,whereas the protein expression of PKCαwas reduced by 78%in sgc7901/VCR/aPKC cells when compared with the sgc7901/VCR ***7901/VCR/aPKC cells had a 4.2-fold increase in DOX cytotoxicity,accompanied by a 1.7-fold increase of DOX accumulation in comparison with sgc7901/VCR cells. CONCLUSION:PKCαpositively regulates MDR in sgc7901 cells,and inhibition of PKCαcan partially attenuate MDR in human gastric cancer cells.

关键词： Multi-drug resistance Protein kinase Calpha sgc7901 Gastric cancer

透明质酸、透明质酸酶和RGD抑制胃癌细胞sgc7901黏附侵袭的实验研究

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中华肿瘤杂志 2004年第5期26卷 260-263页

作者：徐惠绵崔越宏董武孙宏吴涛中国医科大学附属第一医院肿瘤科沈阳110001

目的　探讨单独及联合应用透明质酸 (HA)、透明质酸酶 (Hase)和RGD对sgc790 1细胞黏附和侵袭细胞外基质 (ECM)的抑制作用。方法　采用间接免疫荧光法测定sgc790 1细胞表面CD4 4与integrinβ1蛋白表达。单独或联合应用HA、Hase和RGD处理... 详细信息

目的　探讨单独及联合应用透明质酸 (HA)、透明质酸酶 (Hase)和RGD对sgc790 1细胞黏附和侵袭细胞外基质 (ECM)的抑制作用。方法　采用间接免疫荧光法测定sgc790 1细胞表面CD4 4与integrinβ1蛋白表达。单独或联合应用HA、Hase和RGD处理体外培养的胃癌细胞sgc790 1;MTT法和Boyden小室模型分别测定其黏附力和侵袭力 ,同时观察细胞形态。结果　人胃癌细胞系sgc790 1表达CD4 4与integrinβ1蛋白。与对照组比较 ,Hase及RGD肽均明显抑制sgc790 1的黏附力(P sgc790 1表达功能性CD4 4和integrinβ1蛋白。单独及联合应用HA、Hase和RGD均不同程度抑制sgc790 1细胞对ECM的黏附和侵袭 ,以联合三者阻断效果为优。

关键词：透明质酸透明质酸酶 RGD 胃癌细胞 sgc7901 细胞黏附细胞外基质

sgc7901-DC融合细胞疫苗表型变化特点的研究

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第三军医大学学报 2006年第2期28卷 163-165页

作者：张坤余佩武高朋芬饶云第三军医大学西南医院普通外科重庆400038 第三军医大学西南医院全军眼科中心重庆400038

目的利用细胞融合技术,获取sgc7901胃癌细胞-DC融合细胞疫苗,并对融合细胞表型变化进行检测,了解其变化特点,为基于树突状细胞的融合疫苗研究及应用提供实验依据。方法利用聚乙二醇(PEG)诱导sgc7901胃癌细胞、树突状细胞融合,利用HAT、H... 详细信息

目的利用细胞融合技术,获取sgc7901胃癌细胞-DC融合细胞疫苗,并对融合细胞表型变化进行检测,了解其变化特点,为基于树突状细胞的融合疫苗研究及应用提供实验依据。方法利用聚乙二醇(PEG)诱导sgc7901胃癌细胞、树突状细胞融合,利用HAT、HT筛选培养系统对融合细胞进行筛选培养,获取纯净融合疫苗;应用直标荧光单克隆抗体进行染色,流式细胞仪检测细胞表型变化特点。结果sgc7901胃癌细胞-DC融合后,融合细胞具备独特的形态学特点,其细胞表面分子表达较亲代DC显著升高。结论sgc7901胃癌细胞-DC融合细胞疫苗具备独特形态学特点,其细胞表面分子表达较亲代DC显著升高,成为其具备更强生物学效应的细胞学基础。

关键词： sgc7901 DC 融合疫苗表型变化生物学效应细胞学基础

瘦素对胃癌细胞系sgc7901增殖和凋亡的影响

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复旦学报（医学版） 2005年第1期32卷 47-50,F003页

作者：赵晓龙朱兆华黄开红夏忠胜中山大学附属第二医院消化科

目的观察人胃癌细胞系sgc7901瘦素及瘦素受体的表达及瘦素对sgc7901增殖及凋亡的影响。方法免疫组化和RT-PCR检测sgc7901瘦素和瘦素受体的表达,噻唑蓝比色实验观察瘦素对sgc7901的增殖作用,流式细胞仪检测瘦素对细胞周期及凋亡的影... 详细信息

目的观察人胃癌细胞系sgc7901瘦素及瘦素受体的表达及瘦素对sgc7901增殖及凋亡的影响。方法免疫组化和RT-PCR检测sgc7901瘦素和瘦素受体的表达,噻唑蓝比色实验观察瘦素对sgc7901的增殖作用,流式细胞仪检测瘦素对细胞周期及凋亡的影响,RT-PCR方法半定量检测瘦素对促凋亡基因bax mRNA 表达的影响。结果sgc7901既表达瘦素又表达瘦素受体,重组瘦素呈剂量依赖性地促进细胞的增殖,并明显抑制细胞的凋亡,瘦素可抑制促凋亡基因bax mRNA的表达。结论瘦素可能以自分泌方式调节人胃癌细胞系 sgc7901的增殖及凋亡。

关键词： sgc7901 瘦素受体促凋亡基因增殖作用表达人胃癌细胞胃癌细胞系 RNA 半定量检测自分泌

shRNA沉寂HK-Ⅱ表达对胃癌sgc7901细胞增殖、凋亡的影响

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世界华人消化杂志 2010年第18期18卷 1860-1866页

作者：吴平安李国华万娟王翀杨霞南昌大学第一附属医院消化科江西省南昌市330006

目的:观察shRNA沉寂HK-Ⅱ基因的表达对胃癌细胞株sgc7901细胞增殖、凋亡的影响,初步评价HK-Ⅱ基因治疗胃癌的应用前景.方法:取胃癌细胞株sgc7901及胃上皮细胞株GES-1细胞为研究对象,将每株细胞分别分成5组(A:干扰组;B:阳性对照组;C:阴... 详细信息

目的:观察shRNA沉寂HK-Ⅱ基因的表达对胃癌细胞株sgc7901细胞增殖、凋亡的影响,初步评价HK-Ⅱ基因治疗胃癌的应用前景.方法:取胃癌细胞株sgc7901及胃上皮细胞株GES-1细胞为研究对象,将每株细胞分别分成5组(A:干扰组;B:阳性对照组;C:阴性对照组;D:脂质体组;E:空白对照组).用shRNA沉寂胃癌细胞株sgc7901及胃上皮细胞株GES-1细胞中HK-Ⅱ的表达.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染shRNA后每株细胞中各组HK-ⅡmRNA的表达变化;分别用MTT及流式细胞仪检测转染后细胞增殖、凋亡的变化.结果:HK-ⅡmRNA在胃癌细胞株sgc7901细胞中的表达明显高于胃上皮细胞株GES-1细胞(t=12.119,Psgc7901细胞的增殖(F=159.811,Psgc7901的增殖,促进其凋亡;但对胃上皮细胞株GES-1无明显影响.HK-Ⅱ可能成为胃癌治疗的一个靶点.

关键词：己糖激酶短发夹状RNA sgc7901 GES-1

ER-α36对胃癌sgc7901细胞在裸鼠体内生长的影响

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世界华人消化杂志 2011年第28期19卷 2919-2924页

作者：王绪明刘晶晶邓昊陈莹刘丽江武汉大学基础医学院湖北省武汉市43007 江汉大学医学院病理学与病理生理学教研室湖北省武汉市430056

目的:观察ER-α36分子对人胃癌细胞sgc7901在裸鼠体内生长的影响.方法:利用慢病毒转染技术构建稳定高表达和低表达ERα-36分子的重组人胃癌sgc7901细胞株.实验分为空白对照组(sgc7901-Control)、ER-α36低表达组(sgc7901-Low36)和ER-α3... 详细信息

目的:观察ER-α36分子对人胃癌细胞sgc7901在裸鼠体内生长的影响.方法:利用慢病毒转染技术构建稳定高表达和低表达ERα-36分子的重组人胃癌sgc7901细胞株.实验分为空白对照组(sgc7901-Control)、ER-α36低表达组(sgc7901-Low36)和ER-α36高表达组(sgc7901-High36),每组各3只雄性裸鼠.将上述细胞(5×106个/mL)接种裸鼠皮下,建立裸鼠荷瘤模型,连续观测30d.采用瘤结节体积测量和称质量、瘤组织HE染色及免疫组织化学法检测Ki67指数和E-cadherin蛋白表达等方法,鉴定各组细胞生长的情况.结果:全组实验动物均出现移植瘤.第16天开始,sgc7901-High36组裸鼠肿瘤的体积>sgc7901-Control组裸鼠肿瘤的体积>sgc7901-Low36组裸鼠肿瘤的体积,两两之间有显著性差异(Psgc7901-High36组肿瘤的质量(2.58g±0.014g),明显大于sgc7901-Control组(1.32g±0.0245g)和sgc7901-Low36组(0.471g±0.021g),两两之间有显著性差异(Psgc7901-High36组肿瘤细胞的核分裂数(42.33±6.33),明显高于sgc7901-Control组(28.5±0.35)和sgc7901-Low36组(12.5±2.5),两两之间有显著性差异(Psgc7901-High36组(86.35±5.23),明显高于sgc7901-Control组(65.44±4.56)和sgc7901-Low36组(18.25±2.56),两两之间有显著性差异(Psgc7901-High36组肿瘤细胞几乎不表达E-cadherin蛋白,明显低于sgc7901-Control组和sgc7901-Low36组.结论:ER-α36分子在胃癌细胞的生长与增殖中具有重要作用,并可能通过靶向肿瘤细胞的粘附分子而促进肿瘤的侵袭与转移.

关键词：雌激素受体-α36 胃癌 sgc7901

胃癌细胞系sgc7901通过间充质干细胞原纤毛调控钙信号对成骨分化的影响

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中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 2023年第1期16卷 23-32页

作者：陈茜李梦雪王吉春刘杰许洁汪长东重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探究胃癌细胞系sgc7901如何影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化。方法分离SD大鼠乳鼠股骨,获取原代MSCs。将原代MSCs和经血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)处理的原代MSCs分别与胃黏膜细胞系GES-1和胃癌细胞系... 详细信息

目的探究胃癌细胞系sgc7901如何影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化。方法分离SD大鼠乳鼠股骨,获取原代MSCs。将原代MSCs和经血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)处理的原代MSCs分别与胃黏膜细胞系GES-1和胃癌细胞系sgc7901共培养,并以成骨诱导培养基(OS培养基)诱导72 h,提取MSCs总蛋白和总RNA。对总RNA进行RNA-seq检测并对显著差异基因进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和真核直系同源群(euKaryotic Ortholog Groups,KOG)可视化分析;以GAPDH为内参,Western blot检测成骨标志蛋白,钙信号相关蛋白和原纤毛结构相关蛋白表达;对共培养后获取的MSCs总蛋白进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测。结果MSCs原代培养细胞呈多角形或梭形;经过成骨诱导培养基(OS培养基)诱导,茜素红染色矿化结节呈红色;以sgc7901为对照,MSCs细胞高表达CD44,低表达CD34。与GES-1共培养相比,sgc7901共培养的MSCs中骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和Runx2表达均降低(Psgc7901共培养上调了MSCs中乙酰化α-微管蛋白和γ-微管蛋白表达(Psgc7901共培养的MSCs中ADRB3和PLN表达均降低(Psgc7901共培养抑制的Runx2和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达水平增加(Psgc7901通过促进MSCs原纤毛生长,抑制钙信号从而抑制MSCs成骨分化。

关键词： sgc7901 间充质干细胞成骨分化原纤毛钙信号

锰型超氧化物岐化酶基因转染抑制sgc7901胃癌细胞增殖的机制

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世界华人消化杂志 2005年第12期13卷 1386-1389页

作者：陈坚林庚金程建唐峰朱虹光刘珊林复旦大学附属华山医院消化科上海市200040 复旦大学上海医学院生化教研室上海市200032 复旦大学附属华山医院病理科上海市200040

目的:我们已经报道锰型超氧化物岐化酶(MnSOD)高表达可明显抑制sgc7901胃癌细胞的增殖,本研究拟进一步探索其中所涉及的分子机制.方法:利用DCFH-DA荧光染色方法检测正义、反义及空载sgc7901胃癌细胞株内的活性氧水平透射电镜下观察肿瘤... 详细信息

目的:我们已经报道锰型超氧化物岐化酶(MnSOD)高表达可明显抑制sgc7901胃癌细胞的增殖,本研究拟进一步探索其中所涉及的分子机制.方法:利用DCFH-DA荧光染色方法检测正义、反义及空载sgc7901胃癌细胞株内的活性氧水平透射电镜下观察肿瘤细胞形态及细胞器结构改变.RT—PCR方法检测三者缺氧诱导因子HIF-1α的表达.结果:正义MnSOD-7901胃癌细胞胞内ROS下降,HIF-1α表达下调.反义组电镜下细胞形态明显小于正义组,正义组线粒体明显较反义组丰富,但两组线粒体均呈空泡状,缺少线粒体嵴.反义组核糖体明显较正义组丰富,内质网也略多.结论:MnSOD依赖的抑制胃癌细胞增殖途径与下调肿瘤的胞内ROS水平,下调HIF-1α的表达及改变细胞器的超微结构有关.

关键词：锰型超氧化物岐化酶基因转染抑制 sgc7901 胃癌细胞增殖