Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3在1型糖尿病和树突状细胞中的作用初探

作     者：黄倩雯 刘香文 任文倩 王超凡 吴秀媚 严晋华 许雯 徐索文 骆斯慧 杨黛稚 Huang Qianwen;Liu Xiangwen;Ren Wenqian;Wang Chaofan;Wu Xiumei;Yan Jinhua;Xu Wen;Xu Suowen;Luo Sihui;Yang Daizhi

作者机构：中山大学附属第三医院内分泌与代谢病学科、广东省糖尿病防治重点实验室广州510630 中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)内分泌科、中国科学技术大学内分泌与代谢病研究所合肥230001 

出 版 物：《中华糖尿病杂志》 (CHINESE JOURNAL OF DIABETES MELLITUS)

年 卷 期：2023年第15卷第6期

页      面：540-546页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：广东省基础与应用基础研究基金(2019A1515010979) 安徽省自然科学基金(2008085MH278) 国家自然科学基金(81530025) 

主　　题：糖尿病,1型 树突状细胞 Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3 

摘      要：目的初步探索ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3(RAC3)在1型糖尿病(T1DM)和树突状细胞(DC)中的作用。方法选取来自广东省T1DM转化医学研究中2011至2016年入组后规律随访的T1DM患者作为病例组,选择2011至2016年来自中山大学附属第三医院就诊的正常糖耐量者作为健康对照组。病例组和对照组均在筛选阶段进行全外显子组测序,在验证阶段进行基因分型。使用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建C57BL/6小鼠背景的RAC3全身敲除(KO)小鼠模型。使用聚合酶链反应(PCR)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting法分别验证RAC3在DNA、RNA和蛋白水平是否被敲除。通过流式细胞染色检测RAC3 KO小鼠和同窝野生对照(WT)小鼠(每组3只)的DC分化比例以及主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(MHCⅡ)、CD86和CD80等成熟活化指标的表达水平。采用logistic回归分析法比较病例组和对照组之间等位基因频率分布的差异。组间比较采用独立样本t检验。结果筛选阶段共纳入72例T1DM患者和487名健康对照,验证阶段共纳入122例T1DM患者和577名健康对照。筛选阶段结果显示,T1DM患者中RAC3 rs4969478位点的等位基因T频率高于健康对照[分别为7.64%(11/144)和1.13%(11/974),OR=9.38,P0.05)。结论遗传学研究提示RAC3可能是人类T1DM的易感基因,但可能不通过DC参与T1DM的发生。