PA-MSHA通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌耐西妥昔单抗耐药结肠癌SW480细胞的增殖、迁移和侵袭

作     者：张欢欢 单武林 ZHANG Huanhuan;SHAN Wulin

作者机构：中国科学技术大学附属第一医院肿瘤表观遗传学研究室安徽合肥230031 中国科学技术大学附属第一医院检验科安徽合肥230031 

出 版 物：《肿瘤》 (Tumor)

年 卷 期：2022年第42卷第4期

页      面：254-264页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：安徽省自然科学基金项目(1908085QH375) 

主　　题：结肠肿瘤 PA-MSHA 西妥昔单抗 细胞增殖 细胞运动 

摘      要：目的:研究铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝素(pseudomonas aeruginosa mannose-sensitive hemagglutinin,PA-MSHA)对西妥昔单抗耐药结肠癌SW480细胞(SW480-R)增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨可能的作用机制。方法:用不同浓度的西妥昔单抗处理亲本SW480细胞和耐药SW480-R细胞,采用CCK-8法检测亲本和耐药细胞对西妥昔单抗的敏感性。用不同浓度的PA-MSHA处理SW480-R细胞,采用CCK-8法检测PAMSHA对SW480-R细胞增殖能力的影响,实时荧光定量PCR法检测对SW480-R细胞中微RNA(micro,miR)-7-5p表达的影响,划痕愈合实验和Transwell小室法检测对SW480-R细胞迁移和侵袭能力的影响。采用脂质体转染的方法将miR-7-5p-模拟物(mimics)转入SW480-R细胞再用PA-MSHA处理后,采用划痕愈合实验和Transwell小室实验检测miR-7-5p过表达对PA-MSHA抑制SW480-R细胞迁移和侵袭能力的影响,最后用蛋白印迹法检测对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路中β-catenin和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平的影响。结果:结肠癌SW480-R细胞对西妥昔单抗的敏感性低于SW480细胞(P0.05),成功建立对西妥昔单抗耐药的结肠癌细胞。与对照组相比,PA-MSHA可以明显抑制SW480-R细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P均0.01),且呈剂量依赖性。PA-MSHA刺激后,miR-7-5p的表达水平上调(P0.01);miR-7-5p过表达明显增强PA-MSHA抑制SW480-R细胞迁移和侵袭的能力(P0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,PA-MSHA刺激后,Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin的表达水平下调,E-cadherin的表达水平上调(P均0.01),提示Wnt/β-catenin信号通路的活性被抑制;miR-7-5p过表达进一步降低β-catenin的表达水平,上调E-cadherin蛋白的表达水平(P均0.05)。结论:PA-MSHA可能通过调控miR-7-5p/Wnt/β-catenin通路抑制西妥昔单抗耐药结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。