Alda-1通过调控ACSL4/GPx4铁死亡途径减轻猪心肺复苏后脑损伤

作     者：陈闯 马霜霜 廖吕钊 肖宇 戴海文 Chen Chuang;Ma Shuangshuang;Liao Lyuzhao;Xiao Yu;Dai Haiwen

作者机构：浙江医院急诊科杭州310030 

出 版 物：《中华危重病急救医学》 (Chinese Critical Care Medicine)

年 卷 期：2023年第35卷第4期

页      面：376-380页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：浙江省医药卫生科技计划项目(2019KY258 2020KY005) 

主　　题：心肺复苏 脑损伤 Alda-1 铁死亡 

摘      要：目的探讨乙醛脱氢酶2特异性激活剂Alda-1是否通过抑制长链脂酰辅酶A合成酶4/谷胱甘肽过氧化物酶4(ACSL4/GPx4)通路介导的铁死亡过程来减轻猪心肺复苏(CPR)后脑损伤。方法将22只普通级健康雄性白猪按照随机数字表法分为假手术(Sham)组(n=6)、CPR模型组(n=8)和Alda-1干预组(CPR+Alda-1组,n=8)。采用经右心室电刺激致颤诱导心搏骤停8 min后CPR 8 min的方法制备猪CPR模型;Sham组仅进行相关准备操作。CPR+Alda-1组于复苏后5 min静脉注射Alda-10.88 mg/kg;Sham组和CPR模型组注射等量生理盐水。各组分别于制模前及复苏后1、2、4、24 h取股静脉血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S100β蛋白的血清水平。于复苏后24 h采用神经功能缺损评分(NDS)评估动物神经功能状态;然后处死动物取大脑皮质,采用普鲁士蓝染色法检测铁沉积水平,采用比色法检测丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测ACSL4及GPx4的蛋白表达水平。结果与Sham组比较,CPR模型组和CPR+Alda-1组NSE及S100β血清水平均随复苏后时间延长呈持续升高趋势,且复苏后24 h NDS评分及大脑皮质铁沉积水平和MDA含量明显升高,大脑皮质GSH含量及GPx4蛋白表达明显下降,ACSL4蛋白表达明显上调,说明CPR术后大脑皮质细胞发生铁死亡,且ACSL4/GPx4通路参与该组织细胞铁死亡的过程。与CPR模型组比较,CPR+Alda-1组复苏后2 h起NSE及S100β血清水平即明显降低〔NSE(μg/L):24.1±2.4比28.2±2.1,S100β(ng/L):2279±169比2620±241,均P0.05〕,且复苏后24 h NDS评分及大脑皮质铁沉积水平和MDA含量明显降低〔NDS评分(分):120±44比207±68,铁沉积:(2.61±0.36)%比(6.31±1.66)%,MDA(μmol/g):2.93±0.30比3.68±0.29,均P0.05〕,大脑皮质GSH含量及GPx4蛋白表达明显升高〔GSH(mg/g):4.59±0.63比3.51±0.56,GPx4蛋白(GPx4/GAPDH):0.54±0.14比0.21±0.08,均P0.05〕,ACSL4蛋白表达明显下调(ACSL4/GAPDH:0.46±0.08比0.85±0.13,P0.05),说明Alda-1可能通过调控ACSL4/GPx4通路减轻猪CPR后大脑皮质细胞铁死亡程度。结论Alda-1可减轻猪CPR后脑损伤,该保护作用可能与抑制ACSL4/GPx4通路介导的铁死亡过程有关。