丹酚酸A抑制NF-κB信号通路减轻脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症反应

作     者：黄贝 张雯 宋俊科 张丽 杜立达 毕研才 岳义松 杨海光 杜冠华 HUANG Bei;ZHANG Wen;SONG Jun-ke;ZHANG Li;DU Li-da;BI Yan-cai;YUE Yi-song;YANG Hai-guang;DU Guan-hua

作者机构：中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所药物靶点研究与新药筛选北京市重点实验室北京100050 中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所药物晶型研究北京市重点实验室北京100050 山东济世药业有限公司山东济南271100 

出 版 物：《中国药理学与毒理学杂志》 (Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology)

年 卷 期：2023年第37卷第4期

页      面：241-248页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82004071) 中国科协青年人才托举工程项目(YESS20200108) 北京市科协青年人才托举工程(BYESS2023314) 中国医学科学院医学与健康科技创新工程重大协同创新项目(2021-I2M-1-005) 山东省重点研发计划(2019JZZY020909) 

主　　题：丹酚酸A NF-κB 脂多糖 BV2小胶质细胞 炎症 

摘      要：目的利用脂多糖(LPS)刺激BV2小胶质细胞构建体外神经炎症模型,探讨丹酚酸A(SalA)对神经炎症的抑制作用及机制。方法(1)BV2细胞分为细胞对照组(正常培养24 h)、LPS(1 mg·L^(-1)孵育24 h)组、SalA(0.01,0.05,0.5,5,10和20μmol·L^(-1)培养24 h)组和LPS+SalA(加入LPS 1 mg·L^(-1)及SalA 0.01,0.05,0.5,5,10和20μmol·L^(-1)共同培养24 h)组,MTT法检测细胞存活率。(2)除LPS+SalA组SalA给药浓度为0.05,0.5和5μmol·L^(-1)外,其他分组处理同方法(1)。Griess法检测BV2细胞一氧化氮(NO)分泌水平,ELISA检测BV2细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6分泌水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测TNF-α,IL-1β和IL-6 mRNA表达水平,Western印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达水平及NF-κB P65和NF-κB抑制因子α(IκBα)的磷酸化水平,免疫荧光法检测iNOS蛋白表达及NF-κB P65的核转位。结果(1)与细胞对照组相比,LPS 1 mg·L^(-1)和SalA 0.01~20μmol·L^(-1)对BV2细胞存活率无显著影响。(2)与细胞对照组相比,LPS 1 mg·L^(-1)组NO分泌水平显著升高(P0.01),TNF-α,IL-1β和IL-6分泌及mRNA表达水平显著上升(P0.01),iNOS表达水平及NF-κB P65和IκBα磷酸化水平显著升高(P0.01),且iNOS和NF-κB P65蛋白免疫荧光强度显著升高(P0.01);与LPS 1 mg·L^(-1)组相比,SalA5μmol·L^(-1)可使NO表达水平显著降低(P0.01),TNF-α,IL-1β和IL-6分泌及mRNA表达水平显著降低(P0.01)。SalA 0.5和5μmol·L^(-1)可使iNOS表达水平及NF-κB P65和IκBα磷酸化水平显著降低(P0.05,P0.01),且iNOS和NF-κB P65蛋白免疫荧光强度明显降低(P0.01)。结论SalA通过抑制NF-κB信号通路减轻LPS刺激引起的BV2细胞炎症反应。