甘草养阴汤联合甲氨蝶呤干预老年类风湿关节炎小鼠价值及基于DIA蛋白组学分析的效应机制

作     者：张睿 朱兴旺 刘永谱 刘利明 陈艳娟 许选锋 王光义 汪保江 张传富 成志强 刘冬舟 陈永 ZHANG Rui;ZHU Xingwang;LIU Yongpu;LIU Liming;CHEN Yanjuan;XU Xuanfeng;WANG Guangyi;WANG Baojiang;ZHANG Chuanfu;CHENG Zhiqiang;LIU Dongzhou;CHEN Yong

作者机构：暨南大学第二临床医学院(深圳市人民医院)广东深圳518020 南方医科大学中西医结合医院广东广州510330 贵州医科大学附属医院贵州贵阳550004 南方医科大学附属深圳市妇幼保健院广东深圳518172 上海中医药大学附属第七人民医院上海200137 遵义医科大学附属医院贵州遵义563000 

出 版 物：《现代中西医结合杂志》 (Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine)

年 卷 期：2023年第32卷第8期

页      面：1030-1041页

学科分类：10[医学] 

基　　金：中国博士后科学基金项目(2021M701438) 

主　　题：老年类风湿关节炎 炎症性衰老 甘草养阴汤 蛋白组学 

摘      要：目的 探讨老年类风湿关节炎(ERA)小鼠的分泌表型特点及甘草养阴汤联合甲氨蝶呤对ERA小鼠的干预作用和整体效应机制。方法 DBA/1雄性小鼠共72只,随机取10只作为正常组;另取12只建立胶原诱导关节炎(CIA)模型,作为RA组;剩余50只小鼠在CIA模型基础上加D-半乳糖刺激建立ERA模型,将造模成功小鼠随机分为ERA组、甲氨蝶呤组、甘草养阴汤组、甲氨蝶呤+甘草养阴汤组。正常组、RA组、ERA组小鼠给予生理盐水灌胃,每日1次;甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤1 mg/kg灌胃,每周2次;甘草养阴汤组给予甘草养阴汤3.0 g/kg灌胃,每日1次;甲氨蝶呤+甘草养阴汤组给予甲氨蝶呤和甘草养阴汤灌胃,药物用量及方法同甲氨蝶呤组和甘草养阴汤组。各组均灌胃4周。对各组小鼠后肢关节炎病变进行评分,HE染色观察各组踝关节组织水肿、滑膜增生、软骨/骨侵蚀、血管翳形成、脂肪沉积情况并进行评分,采用非依赖采集(DIA)蛋白组学技术分析各组小鼠的分泌表型特点。结果 ERA组后肢肿胀更明显,关节炎评分及肢关节水肿、滑膜增生、软骨/骨侵蚀评分均明显高于RA组(P均0.05);甘草养阴汤组、甲氨蝶呤+甘草养阴汤组关节炎评分及关节水肿、软骨/骨侵蚀、脂肪沉积评分均明显低于ERA组(P均0.05)。ERA组与RA组比较,上调71个蛋白,下调70个蛋白,主要富集于中性粒细胞胞外陷阱形成、脂质和动脉粥样硬化、鞘脂信号通路等。甲氨蝶呤+甘草养阴汤除了对多种炎症因子的抑制作用,还倾向于对脂质代谢等通路靶点的调节,尤其是上调叶酸合成通路相关靶点。结论 ERA小鼠的代谢改变可能导致更为严重的关节损伤,甘草养阴汤对甲氨蝶呤治疗ERA具有减毒增效作用。