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丹参酮IIA对多房棘球蚴原头节体外活性及生长的影响

Effects of tanshinone IIA on the Activity and growth of Echinococcus multilocularis protoscoleces in vitro

作     者:彭妍 贾云超 卓怡呈 多小勇 张示杰 PENG Yan;JIA Yunchao;ZUO Yicheng;DUO Xiaoyong;ZHANG Shijie

作者机构:石河子大学医学院新疆石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科 

出 版 物:《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期:2023年第18卷第6期

页      面:689-694页

核心收录:

学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金项目(No.8176120052) 

主  题:多房棘球蚴 原头节 丹参酮IIA 凋亡 

摘      要:目的探究丹参酮IIA对多房棘球蚴原头节体外活性及生长的影响。方法从沙鼠体内获取多房棘球蚴原头节并在体外培养3d后分别与250、500、1000μmol/L丹参酮IIA共培养7d,以DMEM为空白对照组,DMSO为溶剂对照组,显微镜下观察各组原头节形态及活性(活性良好的原头节不被伊红染色),计算存活率并绘制活力曲线;共培养24h后用活性氧(ROS)测定试剂盒测定各组原头节的ROS水平;共培养2d后用Westernblot检测各组原头节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3相对表达量;扫描电镜观察共培养2d时各组原头节表面显微结构。多房棘球蚴原头节与大鼠肝癌细胞共培养8~9周形成多房棘球蚴囊泡,囊泡分别与两对照组、250、500、1000μmol/L丹参酮IIA共培养2 d,扫描电镜观察囊泡生发层显微结构。结果原头节与250、500、1000μmol/L丹参酮IIA共培养2d,随着药物浓度的升高原头节形态结构发生改变,虫体模糊不清且红染率升高,原头节活性受抑制;共培养2d时空白对照组、溶剂对照组活力分别为100%、(98.53±0.503)%,250、500和1000μmol/L组多房棘球蚴原头节活力分别为(81.00±3.606)%、(63.97±3.275)%、(37.07±3.296)%(F=298.1,P0.05);第7d时空白对照组和溶剂对照组多房棘球蚴原头节活力分别为(98.33±0.577)%、(93.90±0.529)%,250和500μmol/L组多房棘球蚴原头节活力分别为(51.67±7.638)%、(9.37±6.075)%,均低于对照组(P0.05)。1000μmol/L丹参酮IIA组杀伤作用最强,原头节均死亡。共培养24h,各浓度丹参酮IIA组原头节ROS水平显著高于对照组(均P0.05);共培养2d,随药物浓度增加,各浓度丹参酮IIA组原头节Bcl-2表达减少,Bax和Caspase-3表达升高(均P0.05)。扫描电镜观察各浓度丹参酮IIA组原头节显微结构出现不同程度破坏甚至破裂,空白对照组和溶剂对照组原头节结构正常;不同浓度丹参酮IIA与囊泡共培养2d后扫描电镜观察囊泡生发层显微结构,可见生发层细胞不同程度地出现脱落、破裂。空白对照组和溶剂对照组生发层细胞包膜完整、形态饱满,并可见大量小的生发囊。结论丹参酮IIA对多房棘球蚴原头节体外活性及生长具有抑制作用,该抑制作用可能与丹参酮IIA打破原头节抗氧化防御系统的平衡、诱导细胞凋亡及抑制生发层细胞生长有关。

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