自噬在氯化镉诱导小鼠初级精母细胞凋亡中的作用

作     者：张玲 王一翔 易玲娜 黄鼎宇 张宇倩 库努都孜阿依·米尔卡米 程意 任全龙 Zhang Ling;Wang Yixiang;Yi Lingna;Huang Dingyu;Zhang Yuqian;Mirqami Kunuduz Ayi;Cheng Yi;Ren Quanlong

作者机构：武汉科技大学医学院公共卫生学院湖北省职业危害识别与控制重点实验室武汉430065 

出 版 物：《卫生研究》 (Journal of Hygiene Research)

年 卷 期：2023年第52卷第3期

页      面：489-496页

核心收录：

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100402[医学-劳动卫生与环境卫生学] 10[医学] 

基　　金：湖北省公共卫生领军人才选拔培养计划(第二层次)(No.鄂卫通73号) 湖北省高等学校优秀中青年技术创新团队项目(No.T2020003) 大学生创新创业训练计划项目(No.201910488020) 

主　　题：镉 小鼠 初级精母细胞 自噬通量 凋亡 

摘      要：目的探究自噬在氯化镉(cadmium chloride,CdCl_(2))诱导小鼠初级精母细胞(GC-2 spd)凋亡中的作用及其潜在作用机制。方法以不同浓度CdCl_(2)(0、5和10μmol/L)染毒GC-2 spd细胞24 h。Hoechst33342染色法和单丹磺酰戊二胺法分别检测凋亡小体和自噬体;TUNEL荧光染色检测细胞凋亡情况;在不含/含CdCl_(2)(10μmol/L)的细胞培养液中分别加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(60μmol/L)、凋亡抑制剂胱天蛋白酶家族抑制剂(50 nmol/L)、自噬激动剂雷帕霉素(50 nmol/L)和溶酶体抑制剂氯喹(10μmol/L)处理GC-2 spd细胞24 h,Western blot检测细胞内自噬相关蛋白LC3、P62以及促凋亡蛋白cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9的表达水平。结果CdCl_(2)染毒细胞24 h后,自噬体聚集且凋亡细胞增多。Western blot结果显示,5和10μmol/L CdCl_(2)染毒组LC3II/LC3I蛋白表达水平与对照组(5.50±0.56)相比分别升高为9.23±0.81和12.15±0.80(P0.05)。与CdCl_(2)组相比,RAPA能增强CdCl_(2)诱导的LC3II/LC3I、LC3II和P62蛋白表达水平,分别为2.22±0.21(CdCl_(2)组为1.56±0.06)、3.72±0.21(CdCl_(2)组为2.97±0.15)和2.41±0.19(CdCl_(2)组为1.52±0.35)(P值均0.05)。Western blot结果显示,与CdCl_(2)组比较,CdCl_(2)与CQ处理组LC3II/LC3I、LC3II、P62和cleaved Caspase-3的表达水平明显增加为3.21±0.31(CdCl_(2)组为2.09±0.25)、4.49±0.43(CdCl_(2)组为2.72±0.26)、2.59±0.19(CdCl_(2)组为1.84±0.19)和2.43±0.23(CdCl_(2)组为1.50±0.27)(P值均0.05)。结论氯化镉可能通过抑制自噬体-溶酶体融合阻滞自噬通量,促使自噬体异常聚集,诱导小鼠初级精母细胞发生凋亡。