重组载体pEGFP-ANG的构建及ANG基因在HUVEC中的表达

作     者：张宏斌 王捷 武婕 江悦华 杨太成 冼江 杨传红 郑文岭 

作者机构：广州军区广州总医院医学实验科广东广州510010 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2004年第20卷第1期

页      面：15-18页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：广东省自然科学基金资助 (No .960 668) 军队"九五"医药卫生科研基金资助 (No .96D0 331 ) 

主　　题：人血管生成素 克隆 基因转染 真核表达 

摘      要：目的 :建立血管生成素 (angiogenin ,ANG)基因的真核表达系统。方法 :采用化学合成拼接法 ,获得人ANG全长cDNA并测序 ,构建重组荧光真核细胞表达质粒 pEGFP ANG ,然后经脂质体介导转染人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)。应用荧光显微镜观测及免疫组化染色 ,对转染细胞内 pEGFP ANG的表达进行鉴定。结果 :测序表明 ,编码的氨基酸序列与人ANG完全一致。荧光显微镜下可见转染的HUVEC内发出强绿色荧光。免疫组化检测显示 ,转染的HUVEC中有棕色颗粒。结论 :获得了人ANG的全长编码基因。构建的重组体pEGFP ANG转染HUVEC后 。