三叶青黄酮对食管鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭及自噬的影响

作     者：殷晓庆 涂铭书 庄婉珍 夏雨 张毅 黄毅 YIN Xiaoqing;TU Mingshu;ZHUANG Wanzhen;XIA Yu;ZHANG Yi;HUANG Yi

作者机构：福建中医药大学中西医结合学院福建福州350122 福建省立医院福建福州350001 

出 版 物：《福建中医药》 (Fujian Journal of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2023年第54卷第4期

页      面：17-20,32页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：福建省医学创新课题基金项目(2020CXB001) 福建省立医院2020年“创双高”火石基金项目(2020HSJJ06) 

主　　题：三叶青黄酮 自噬 细胞迁移侵袭 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ p62 

摘      要：目的 探讨三叶青黄酮对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞迁移、侵袭及自噬的影响。方法 取对数生长期的人ESCC细胞株KYSE150细胞(以下简称KYSE150细胞)分为0μg/mL组、25μg/mL组、50μg/mL组、75μg/mL组,采用CCK-8法检测三叶青黄酮溶液干预0、24、48 h后各组细胞活力并计算干预48 h的半抑制浓度(IC_(50)),筛选出三叶青黄酮溶液最佳干预浓度为50μg/mL。取对数生长期的KYSE150细胞分为0μg/mL组、50μg/mL组,采用Transwell小室法检测三叶青黄酮溶液干预48 h后2组细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量。取对数生长期的KYSE150细胞分为空白组、氯喹组、三叶青黄酮组、三叶青黄酮+氯喹组,空白组不使用药物干预,氯喹组加入10μmol/L氯喹,三叶青黄酮组加入50μg/mL三叶青黄酮溶液,三叶青黄酮+氯喹组加入10μmol/L氯喹与50μg/mL三叶青黄酮溶液干预,均干预48 h后采用Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量。结果 与0μg/mL组比较,各药物组随着三叶青黄酮溶液浓度的增加,KYSE150细胞活力均逐渐下降(P均0.05);与0μg/mL组比较,50μg/mL组KYSE150细胞迁移和侵袭数量,N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量均降低(P均0.05);与空白组比较,氯喹组、三叶青黄酮组及三叶青黄酮+氯喹组KYSE150细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量均显著增高(P均0.05);与氯喹组比较,三叶青黄酮+氯喹组KYSE150细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量增高更显著(P0.05)。结论 三叶青黄酮可下调N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量以抑制ESCC细胞的迁移和侵袭能力,上调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与p62的表达诱导自噬体的产生,从而抑制细胞自噬流,发挥对ESCC细胞活力的抑制作用。