新型ISSR分子标记鉴别香菇双单杂合子

作     者：吴圣进 张芳芳 陈雪凤 刘增亮 张雯龙 WU Shengjin;ZHANG Fangfang;CHEN Xuefeng;LIU Zengliang;ZHANG Wenlong

作者机构：广西壮族自治区农业科学院微生物研究所广西南宁530007 

出 版 物：《热带作物学报》 (Chinese Journal of Tropical Crops)

年 卷 期：2023年第44卷第3期

页      面：476-483页

学科分类：08[工学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：广西科技计划项目(桂科AB21196069) 广西特色作物试验站建设专项(No.TS202115) 国家现代农业产业技术体系广西食用菌创新团队建设专项(No.Nycytxgxcxtd-2021-07-02)。 

主　　题：香菇 新型ISSR 双单杂交 杂合子 分子鉴别 

摘      要：杂合子的鉴别是香菇杂交育种中的关键步骤,为了快速准确地鉴别香菇双单杂交后代,本研究设计一种基于区分供体亲本双核的新型ISSR分子标记技术,采用该技术对香菇野生双核菌株YX7为供体和菌株808孢子单核体为受体杂交获得的40个杂交菌株进行鉴别,并以传统的显微观察与拮抗试验和传统ISSR分子标记技术为对照。新型ISSR分析结果表明:仅拥有供体菌株YX7一个核的特异性条带的菌株有27个,可判定为杂合子;其余13个菌株均判定为非杂合子,其中有11个菌株同时拥有供体菌株YX7两个核的特异性条带,是菌株YX7自身;有2个菌株不含供体菌株YX7两个核的任何特异性条带,属于菌株808的孢子单核体。与传统显微观察和拮抗试验方法相比,新型ISSR技术鉴定出的杂合子菌株更全面,不仅包含前者鉴定出的全部19个杂合子,还包括其无法判断的菌株6个和错判为非杂合子的菌株2个。新型ISSR技术采用单个引物就可确定全部27个杂合子菌株和13个非杂合子菌株,并能根据导入的供体细胞核类别将杂合子归为2类,而传统ISSR技术需采用4个引物才能鉴别出27个杂合子,并且不能确定剩余13个菌株为非杂合子,也不能对杂合子进行分类。综上,新型ISSR技术能更快速、全面和精准鉴别香菇双单杂交菌株的杂合子和非杂合子,可为香菇杂交选育和遗传分析提供技术支撑。