HIF1α通过启动ALKBH5调控整合素蛋白αν表达的机制研究

作     者：周丽颖 张宇迪 王丽 王树玉 Zhou Liying;Zhang Yudi;Wang Li;Wang Shuyu

作者机构：首都医科大学附属北京妇产医院、北京妇幼保健院生殖医学科北京100026 

出 版 物：《中华生殖与避孕杂志》 (Chinese Journal of Reproduction and Contraception)

年 卷 期：2023年第43卷第4期

页      面：371-380页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100211[医学-妇产科学] 10[医学] 

基　　金：首都医科大学科研培育基金(PYZ19057) 北京市医院管理局培育计划(PX2018053) 

主　　题：子宫内膜容受性 缺氧诱导因子1α ALKBH5 N6-甲基腺苷甲基化 整合素蛋白αν 

摘      要：目的探索缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF1α)启动N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)去甲基化酶ALKBH5改善子宫内膜容受性分子标志物整合素蛋白αν(integrinαν,ITGAV)表达的内在机制。方法利用人子宫内膜癌Ishikawa细胞,低氧以及干扰HIF1α条件下实时荧光定量PCR(real time quantity PCR,RT-PCR)或Western blotting检测ALKBH5的表达;过表达或干扰ALKBH5表达后,RT-PCR或Western blotting检测对ITGAV基因和蛋白表达的影响;荧光素酶报告基因系统分析miR-136-5p靶向ITGAV mRNA表达;RNA pull-down分析及m6A甲基化检测ALKBH5与miR-136-5p竞争性结合ITGAV mRNA上甲基化位点序列。结果低氧条件下HIF1α时间依赖性促进ALKBH5蛋白在Ishikawa细胞中的表达。过表达ALKBH5后,ITGAV的表达水平升高(P0.001),Ishikawa细胞增殖能力增强(P0.001);ALKBH5敲除后,ITGAV的表达水平降低(P0.001),Ishikawa细胞的增殖能力下降(P=0.019)。miR-136-5p靶向调节ITGAV mRNA后,ITGAV mRNA(P=0.007)和蛋白表达水平(P=0.015)下调。miR-136-5p靶向调节ITGAV的序列与ALKBH5所识别的甲基化位点所在序列重叠,两者在调控ITGAV mRNA上存在竞争性。结论HIF1α通过调控ALKBH5,竞争性地结合miR-136-5p所靶向的ITGAV mRNA上特定序列,精细化调节ITGAV的表达,改善子宫内膜容受性。