人羊膜上皮干细胞通过调节M1/M2型巨噬细胞极化减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的实验研究

作     者：疏文志 杨梦凡 潘斌华 苏仁义 林祖源 杨墨丹 张镇胜 宋一粟 卢正阳 郑树森 徐骁 魏绪勇 Shu Wenzhi;Yang Mengfan;Pan Binhua;Su Renyi;Lin Zuyuan;Yang Modan;Zhang Zhensheng;Song Yisu;Lu Zhengyan;Zheng Shusen;Xu Xiao;Wei Xuyong

作者机构：浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院肝胆胰外科310006 浙江大学医学院杭州310058 浙江省肿瘤融合研究与智能医学重点实验室杭州310006 树兰(杭州)医院310022 

出 版 物：《中华移植杂志（电子版）》 (Chinese Journal of Transplantation(Electronic Edition))

年 卷 期：2023年第17卷第1期

页      面：36-41页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家重点研发计划(2021YFA1100502 2021YFA1100504) 

主　　题：人羊膜上皮干细胞 缺血再灌注损伤 巨噬细胞极化 炎症反应 

摘      要：目的:探讨人羊膜上皮干细胞(hAECs)对小鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及机制。方法:将10只C57BL/6小鼠随机分为对照组(IRI+PBS组)和实验组(IRI+hAECs组),每组各5只。IRI+PBS组经阴茎背静脉注射PBS(100μL),IRI+hAECs组经阴茎背静脉注射hAECs(1×105个),注射后0.5 h进行常温下缺血1.5 h、再灌注6 h。检测小鼠血清ALT、AST和乳酸脱氢酶(LDH)水平,HE染色观察小鼠肝组织病理变化,免疫组织化学染色观察巨噬细胞(F4/80)以及M1(CD68)、M2(CD206)型巨噬细胞浸润情况。比较两组凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-7以及炎症因子IL-6、IL-23、TNF-α和IL-βmRNA相对表达量。符合正态分布的连续变量资料采用独立样本t检验比较。P0.05为差异具有统计学意义。结果:与IRI+PBS组相比,IRI+hAECs组小鼠肝组织病理损伤明显改善。IRI+hAECs组小鼠血清ALT、AST和LDH分别为(1456±20)、(1375±49)和(2435±147)U/L,IRI+PBS组分别为(3919±48)、(3142±145)和(3499±147)U/L,差异均有统计学意义(t=47.13、11.53和4.53,P均0.05)。IRI+hAECs组BCL-2、BAX、Caspase-3和Caspase-7 mRNA表达水平分别为(0.20±0.05)、(0.19±0.09)、(0.46±0.13)和(0.27±0.03),均低于IRI+PBS组的(1.01±0.16)、(1.02±0.28)、(1.01±0.17)和(1.00±0.11),差异均有统计学意义(t=8.45、4.88、4.39和10.79,P均0.05)。免疫组化染色结果显示,巨噬细胞在IRI+hAECs组浸润更低。IRI+hAECs组IL-6、IL-23、TNF-α和IL-βmRNA水平分别为(0.38±0.04)、(0.33±0.05)、(0.43±0.08)和(0.12±0.04),均低于IRI+PBS组的(1.10±0.11)、(1.00±0.05)、(1.00±0.02)和(1.10±0.06),差异均有统计学意义(t=11.27、16.37、12.96和22.34,P均0.05)。M1型巨噬细胞在IRI+hAECs组表达明显降低,M2型巨噬细胞比例升高。结论:hAECs通过调节M1/M2型巨噬细胞极化,减轻炎症反应,从而在小鼠肝脏IRI中发挥保护作用。