慢病毒介导miRNA-184体外转染对人晶状体上皮细胞上皮间质转分化的影响

作     者：徐庆 李贞 张慧 Xu Qing;Li Zhen;Zhang Hui

作者机构：上海建工医院眼科200083 

出 版 物：《中华眼科杂志》 (Chinese Journal of Ophthalmology)

年 卷 期：2015年第51卷第4期

页      面：295-300页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：上海市自然科学基金(10ZRl414300) 

主　　题：晶体 上皮细胞 上皮-间质转化 转染 慢病毒属 

摘      要：目的 观察慢病毒介导miRNA-184体外转染对TGF-β2诱导人LEC发生上皮间质转分化（EMT）时其基因表型的影响.方法 实验研究.构建pL/IRES/GFP-miR-184质粒,经慢病毒介导体外转染由TGF-β2诱导而发生EMT的人LEC,利用QRT-PCR检测转染0、6、24 h后人LEC中相关基因E-钙黏蛋白（CDH1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（VIM）表达水平的变化,并与阴性对照慢病毒侵染组进行比较.采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 成功构建pL/IRES/GFP-miR-184质粒,经慢病毒介导转染由TGF-β2诱导而发生EMT的人LEC 24 h后,上皮细胞标志性基因CDH1相对表达量保持相对不变,24 h时为6.30E-06,而对照组则下调,24 h时为1.37E-06,差异有统计学意义（F=261.78,P0.01）;间质细胞标志性基因α-SMA和VIM的相对表达量均保持相对不变,24 h时分别为1.55E-02和4.61E-04,而对照组则均上调,24 h时分别为2.09E-02和6.73E-04,差异有统计学意义（F=26.21,P=0.007;F=17.91,P=0.013）.结论 miRNA-184经慢病毒介导转染人LEC后,能抑制其由TGF-β2诱导所发生的EMT相关的基因表型变化。