Ets-1基因真核表达载体的构建及其对人ORMDL3启动子的影响

作     者：邱灵芝 金蕊 朱亮华 庄丽丽 封洁 周国平 

作者机构：南京医科大学第一附属医院儿科江苏省210029 

出 版 物：《江苏医药》 (Jiangsu Medical Journal)

年 卷 期：2014年第40卷第7期

页      面：748-751页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81170661 30872804 81300023) 教育部博士点基金(20113234110010) 江苏高校优势学科建设工程资助项目(JX10231081) 江苏省医学重点人才(RC2007050) 江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CX2211_0714) 

主　　题：Ets-1 血清类黏蛋白1样蛋白3 支气管哮喘 

摘      要：目的探讨Ets-1基因对人血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)启动子的影响。方法 RT-PCR扩增Ets-1基因,将产物克隆至真核载体pcDNA3.1(+)内,构建含Ets-1基因的重组真核表达质粒pcDNA-Ets-1。重组质粒转染人胚肾HEK-293细胞,Western blot检测Ets-1蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测Ets-1过表达后人ORMDL3启动子的活性。结果核酸序列分析及Western blot结果证实,构建含Ets-1基因的重组真核表达质粒pcDNA-Ets-1成功;过表达Ets-1基因能增强人ORMDL3启动子的活性。结论成功构建了含Ets-1基因的重组真核表达质粒。Ets-1基因可促进人ORMDL3启动子的转录活性。