LPTS抗体的制备和活性检测

作     者：李义良 宋海 赵静 张红锋 李载平 赵慕钧 LI Yi liang 1,2 SONG Hai 1 ZHAO Jing 1 ZHANG Hong feng 2 LI Zai ping 1 ZHAO Mu jun 1 (1 Institute of Biochemistry and Cell Biology,Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031,China) (2 School of Life Science,East China Normal University, Shanghai 200062,China)

作者机构：中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所上海200031 华东师范大学生命科学学院上海200062 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2004年第24卷第3期

页      面：44-47页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家"8 63"计划资助项目 (2 0 0 2BA711A0 2 ) 

主　　题：LPTS 抗体 活性 亲和层析 免疫荧光 特异性 肝癌 

摘      要：LPTS是利用定位候选克隆策略 ,得到的一个新的肝相关候选肿瘤抑制基因 (anovelliver relatedputativetumorsuppressor) ,为了进一步研究其结构与功能 ,利用DNA重组技术 ,将LPTS的cDNA克隆到融合表达载体pET 2 4a中 ,在E .coli中表达 ,以Ni+柱亲和层析 ,获得纯化的 6×His LPTS融合蛋白。以此为抗原免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体 ,ELISA法检测其滴度达 2 0 0 0 0以上 ,经亲和层析纯化 ,Western印迹结果表明 ,该纯化抗体可与真核表达的HA LPTS蛋白和内源性的LPTS蛋白特异性结合 ;免疫荧光分析显示SMMC 772 1细胞内源性表达的LPTS蛋白呈点状分布于细胞核内。以上结果表明获得了效价高 ,活性强的针对LPTS蛋白的多克隆抗体 。