检测脑膜炎球菌多糖疫苗Y群多糖含量和分子大小的双抗体夹心ELISA法的建立和初步应用

作     者：肖詹蓉 潘殊男 王宇星 张霖阳 王玲 史雨舟 张萍 XIAO Zhan-rong;PAN Shu-nan;WANG Yu-xing;ZHANG Lin-yang;WANG Ling;SHI Yu-zhou;ZHANG Ping

作者机构：北京天坛生物制品股份有限公司细菌性疫苗研究室100024 

出 版 物：《国际生物制品学杂志》 (International Journal of Biologicals)

年 卷 期：2012年第35卷第5期

页      面：228-232页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

主　　题：酶联免疫吸附测定 脑膜炎双球菌菌苗 多糖类,细菌 方法 

摘      要：目的建立测定A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖疫苗（groupsA，C，Y，W135meningococ—calpolysaccharidevaccine，MPV4）Y群多糖含量的双抗体夹心ELISA法。方法采用杂交瘤技术制备抗Y群多糖单克隆抗体，并通过过碘酸钠法用辣根过氧化物酶标记单克隆抗体。分别以抗Y群多糖不同位点的单克隆抗体作为包被抗体和酶标二抗，通过优化反应条件来建立双抗体夹心ELISA法，同时进行方法学验证。结果建立的双抗体夹心ELISA法特异性良好，未检出与A、C、W135群多糖的交叉反应。Y群多糖在2．5～20．0ng／ml范围的剂量反应曲线呈现最佳线性关系，相关系数〉0．99。该法的试验内和试验间准确度较好，精密度较佳，定量限度为4ng／ml。采用该法测定3批MPV4Y群多糖显示，Y群多糖的含量、多糖分子大小‰值和回收率的结果均与先前的检定结果一致，符合暂行质量标准。结论建立的双抗体夹心ELISA法可用于MPV4Y群多糖的关键质量指标测定。