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吸附无细胞百(三组分)白破联合疫苗内毒素定量检测方法的建立及验证

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国际生物制品学杂志 2024年第3期47卷 139-144页

作者：刘婷赵芳圆李世慧张霖阳吕溪琳赵明北京生物制品研究所有限责任公司研究开发室北京100176

目的建立吸附无细胞百日咳(三组分)-白喉-破伤风联合疫苗﹝diphtheria, tetanus and acellular pertussis (three components) combined vaccine, adsorbed, DTacP﹞内毒素含量的定量检测方法, 并对其进行验证。方法采用动态显色法(美... 详细信息

目的建立吸附无细胞百日咳(三组分)-白喉-破伤风联合疫苗﹝diphtheria, tetanus and acellular pertussis (three components) combined vaccine, adsorbed, DTacP﹞内毒素含量的定量检测方法, 并对其进行验证。方法采用动态显色法(美洲鲎试剂)检测DTacP的内毒素含量, 并对该方法的线性与范围、专属性、准确度、中间精密度、重复性、定量限进行验证, 并与凝胶法结果进行比较。结果动态显色法的线性相关系数的绝对值大于0.99;DTacP稀释100倍和1 000倍, 对试验均无干扰作用;3批DTacP内毒素检测结果的准确度回收率分别为56%、75%、80%, 重复性的变异系数分别为5.59%、7.14%、5.81%;不同操作人员在不同时间检测3批DTacP中内毒素结果的变异系数分别为15.93%、8.48%和7.43%;将光密度反应阈值30毫吸光度单位增减3毫吸光度单位, 耐用性的相对偏差均小于15%。DTacP中内毒素含量检测的定量限为30内毒素单位(endotoxin unit, EU)/ml。动态显色法检测3批DTacP中内毒素含量的检测结果与凝胶法结果一致, 均小于限定值200 EU/ml。结论建立了定量检测DTacP中内毒素含量的动态显色法, 该法具有良好的线性、专属性、准确度、中间精密度以及重复性, 可用于DTacP中内毒素含量的定量检测。

关键词：白喉-破伤风-脱细胞百日咳菌苗内毒素类动态显色法联合疫苗定量检测方法验证

脑膜炎球菌W135群多糖含量和分子大小双抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用

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中国生物制品学杂志 2012年第12期25卷 1688-1691,1696页

作者：潘殊男肖詹蓉王宇星张霖阳史雨舟孙芳芳张萍北京天坛生物制品股份有限公司细菌性疫苗研究室北京100024

目的建立检测A、C、Y、W135群脑膜炎球菌（Neisseria meningitidis,Nm）多糖疫苗（Groups A,C,Y,W135 menig-nococcal polysaccharide vaccine,MPV4）中W135群多糖含量和分子大小的双抗体夹心ELISA法,并进行初步应用。方法以抗W135群Nm多克隆抗体作为包被抗体,建立双抗体夹心ELISA法,采用棋盘滴定法筛选包被抗体与酶标抗体的最佳工作浓度,对W135群Nm多糖进行特异性定量测定,并验证线性关系的重复性;对建立的ELISA法进行特异性、准确度、精密度及定量限的验证;采用建立的ELISA法检测10批W135群Nm多糖样品和10批无关流脑多糖样品,进行W135群Nm多糖的鉴别试验;采用建立的ELISA法测定MPV4多糖含量、多糖分子大小和回收率。结果经棋盘滴定法确定双抗体夹心ELISA法的最佳包被抗体工作浓度为10μg/ml,最佳酶标抗体工作浓度为1∶15 000稀释,W135群Nm多糖在2.5~20 ng/ml浓度范围内剂量反应曲线线性关系良好,相关系数大于0.99。采用建立的双抗体夹心ELISA法检测W135群Nm多糖为强阳性,检测其余样品的结果均为阴性;试验内及试验间测定16、8、4 ng/ml W135群Nm多糖含量的变异系数在1.1%~9.0%之间,回收率在87.5%~105.0%之间,定量限为4 ng/ml;检测W135群Nm多糖的阳性符合率和无关多糖的阴性符合率均为100%。采用该法测定3批MPV4中W135群多糖含量、分子大小及回收率均符合申报MPV4疫苗暂行规程关于W135群Nm多糖的质量标准。结论建立的双抗体夹心ELISA法可用于MPV4中W135群多糖含量和分子大小的测定。

关键词：脑膜炎球菌多糖疫苗 W135群多糖分子大小酶联免疫吸附测定

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具有执行器饱和的正线性系统的事件触发控制

控制理论与应用 2024年第7期41卷 1304-1312页

作者：杨庚佼郝飞张霖温州大学数理学院浙江温州325035 北京航空航天大学自动化科学与电气工程学院北京100191

尽管事件触发控制策略在提升通信效率方面效果显著,但在实际运用过程中,可能会因为触发次数的减少而导致系统稳定性下降.针对这一问题,本文提出了一种新的事件触发控制策略,实现了执行器饱和正线性系统在通信效率和系统稳定性之间的平衡... 详细信息

尽管事件触发控制策略在提升通信效率方面效果显著,但在实际运用过程中,可能会因为触发次数的减少而导致系统稳定性下降.针对这一问题,本文提出了一种新的事件触发控制策略,实现了执行器饱和正线性系统在通信效率和系统稳定性之间的平衡.首先,引入权重因子构建了一种线性加权事件触发机制,并基于该机制和凸包技术设计了事件触发状态反馈饱和控制器;其次,利用线性余正Lyapunov函数方法,在事件触发机制下分别建立了一般吸引域估计和最大吸引域估计下闭环系统正性和稳定性的充分条件.这些条件可以退化为时间触发机制下的条件,从而实现通信效率和系统性能之间的平衡;再次,给出了事件间隔时间的严格正下界,从而避免了Zeno行为,即系统在有限时间内进行无限次触发;最后,通过一个仿真例子验证了所提出的事件触发控制策略的有效性和优越性.

关键词：正线性系统事件触发机制执行器饱和镇定余正Lyapunov函数 Zeno行为

米曲霉分泌蛋白酶特性分析及其对高盐稀态酱油品质影响的研究

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米曲霉分泌蛋白酶特性分析及其对高盐稀态酱油品质影响的研究

作者：张霖靖仲恺农业工程学院

学位级别：硕士

移动边缘计算场景下针对资源竞争的服务迁移优化方法

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通信学报 2024年第8期45卷 37-50页

作者：王海艳张霖骆健南京邮电大学计算机学院江苏南京210023 江苏省大数据安全与智能处理重点实验室江苏南京210023

针对移动边缘计算(MEC)场景中边缘服务器资源受限导致服务迁移存在资源竞争的问题,基于Lyapunov技术和博弈论,提出了一种针对资源竞争的服务迁移优化方法OMRC-LG。考虑到系统迁移成本有限且当用户数量过多时难以进行轨迹预测,将服务迁... 详细信息

针对移动边缘计算(MEC)场景中边缘服务器资源受限导致服务迁移存在资源竞争的问题,基于Lyapunov技术和博弈论,提出了一种针对资源竞争的服务迁移优化方法OMRC-LG。考虑到系统迁移成本有限且当用户数量过多时难以进行轨迹预测,将服务迁移问题建模为迁移成本约束下的最优化问题,并利用Lyapunov技术将最优化问题转化为不需要预测用户轨迹的在线问题处理。为了缓解资源竞争,提出了一种基于博弈论的分布式方法求解在线问题,通过共享用户服务迁移决策以获取准确的边缘服务器可用资源,并不断更新迁移决策,实现服务迁移优化。仿真结果表明,OMRC-LG方法在满足迁移成本约束的同时,降低了平均服务时延。

关键词：移动边缘计算服务迁移服务时延迁移成本资源竞争

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植物响应逆境胁迫过程中的染色质3D结构重塑

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Science Bulletin 2024年第7期69卷 847-849页

作者：张霖霖刘建祥 State Key Laboratory of Plant Environmental Resilience College of Life SciencesZhejiang UniversityHangzhou 310027China

Being sessile,plants evolve different acclimation strategies at both the transcriptional and post-translational levels to cope with adverse environmental conditions[1].Several recent studies[2–9]have shown that gene expression at transcriptional level under abiotic stress conditions is associated with highly dynamic threedimensional(3D)chromatin reorganization.

关键词： 3D结构 evolve translational

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白喉类毒素酶联免疫检测法的建立及初步应用

微生物学免疫学进展 2016年第2期44卷 45-49页

作者：张霖阳杨冰王珣张娜赵俊王玲北京天坛生物制品股份有限公司细菌性疫苗研究室北京100176 北京天坛生物制品股份有限公司质量保证部北京100176 北京天坛生物制品股份有限公司菌苗室北京100176

目的建立测定吸附无细胞百白破联合疫苗中白喉类毒素酶联免疫检测（ELISA）方法,并进行验证及初步应用。方法以高效价兔抗DT多克隆抗体和相应酶标抗体建立双抗体夹心ELISA法,确定线性范围同时验证该方法的重复性和特异性等确定检测限度... 详细信息

目的建立测定吸附无细胞百白破联合疫苗中白喉类毒素酶联免疫检测（ELISA）方法,并进行验证及初步应用。方法以高效价兔抗DT多克隆抗体和相应酶标抗体建立双抗体夹心ELISA法,确定线性范围同时验证该方法的重复性和特异性等确定检测限度,并初步应用。结果 DT含量在0-0.0160 Lf/m L范围内反应曲线线性关系良好（r〉0.99）。该方法与破伤风类毒素（Tetanus toxoid,TT）、百日咳毒素（Pertussis toxin,PT）、百日咳丝状血凝素（Filamantous hemagglutinin,FHA）与黏着素（Pertactin,Prn）无明显交叉反应,重复性好、特异性较强,精密度及准确度验证均符合常规质控要求,通过验证确定的准确检测范围为0.000 8-0.016 0 Lf/m L;检测限度为0.000 8 Lf/m L。该方法对DT抗原进行了吸附率的检测,同时检测了10批白喉类毒素原液与《中华人民共和国药典》三部2010年版规定的絮状单位检测方法进行对比,变异系数低于20%。结论建立了白喉类毒素双抗体夹心ELISA检测方法,为吸附无细胞百白破联合疫苗生产过程中白喉类毒素含量的质量控制提供了有效技术手段。

关键词：白喉类毒素酶联免疫吸附试验吸附无细胞百白破联合疫苗

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海参胶原蛋白与植物多酚相互作用体系研究

海参胶原蛋白与植物多酚相互作用体系研究

作者：张霖雯大连海洋大学

学位级别：硕士

海参是一种重要的海洋资源,具有抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能。海参含有多种生物活性物质:多糖、多肽、胶原蛋白等,是胶原蛋白潜在的来源。葛根素和槲皮素是主要的植物多酚类物质,葛根素存在于豆科植物葛以及野葛的根部,具有... 详细信息

海参是一种重要的海洋资源,具有抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能。海参含有多种生物活性物质:多糖、多肽、胶原蛋白等,是胶原蛋白潜在的来源。葛根素和槲皮素是主要的植物多酚类物质,葛根素存在于豆科植物葛以及野葛的根部,具有抗心血管疾病、抗炎、降高血压等多种活性,槲皮素来源于葡萄、苹果、洋葱等,具有抗高血压、抗糖尿病、心血管保护等多种活性,对人体健康有重要作用。但是由于其水溶性较差,导致其生物利用率较低,限制其在食品工业中的应用。胶原蛋白与多酚均为食品体系中的主要物质,二者常可以自发发生相互作用而结合形成复合物。所形成的复合物可以更好的发挥胶原蛋白和植物多酚的功能特性。多酚与蛋白的相互作用在提高其营养价值、增加抗氧化性具有重要意义。乳液是很常见的食品形式,也是食品运载体系,应用于包埋和保护活性因子等。因此,本研究以海参、葛根素和槲皮素为主体制备复合物,对其结构表征和性能评价,并探究了胶原蛋白-植物多酚皮克林乳液的性质。主要研究内容和结果如下:（1）以海参为原料,采用胃蛋白酶酸促溶法提取了海参胶原蛋白,通过紫外光谱法、傅立叶变换红外光谱法、差示扫描量热法和氨基酸分析对胶原蛋白的结构和性质进行了研究,紫外光谱表明,胶原蛋白在226 nm处表现出单吸收峰,紫外光谱扫描结果符合胶原蛋白的特征吸收;傅立叶变换红外光谱法表明胶原蛋白具有良好的三螺旋结构;热稳定性分析结果表明,胶原蛋白的最高转变温度为78℃,说明胶原蛋白具有更稳定的三螺旋结构;SDS-PAGE分析得到胶原蛋白分子组成可能为（α）;氨基酸分析结果表明,胶原蛋白中甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸含量较高,羟脯氨酸与脯氨酸的比值为1.09,说明胶原蛋白的结构更接近于I型胶原蛋白。（2）以胶原蛋白、葛根素和槲皮素为原料,制备胶原蛋白-植物多酚非共价复合物和共价复合物,对两种形式复合物进行了结构表征。通过荧光光谱法探究了胶原蛋白与多酚相互作用的猝灭类型、结合常数和结合位点,结果表明多酚可以引起胶原蛋白发生荧光猝灭现象,并且是以剂量依赖的方法产生,其猝灭机制是静态猝灭;紫外光谱表明,随着多酚添加量的增加,胶原蛋白的紫外吸收有规律的增加,说明胶原蛋白和多酚发生了相互作用;红外光谱表明,多酚的加入引起了胶原蛋白二级结构的改变,并且通过酰胺Ⅰ带分析发现,两种复合物的β-折叠增加,无规卷曲减少,α-螺旋减少,β-转角增加;圆二色谱结果表明,多酚的引入会改变胶原蛋白的构象发生改变,通过计算得到α-螺旋减少,β-折叠增加,验证了红外光谱的结果。多光谱法证明了胶原蛋白和葛根素、槲皮素两种多酚发生了相互作用。进一步通过分子对接技术探究了胶原蛋白和两种多酚相互作用产生的机制,结果表明胶原蛋白和两种多酚相互作用方式主要通过疏水作用,另外氢键也起着重要作用。同时测定了胶原蛋白-多酚复合物的DPPH、ABTS、羟基自由基三种抗氧化能力,结果表明,随着多酚的加入,胶原蛋白和多酚的共价和非共价两种结合方式都表现出较高的抗氧化性。（3）通过超声波细胞破碎的方法制备了胶原蛋白稳定的皮克林乳液,研究了胶原蛋白的浓度、pH值对皮克林乳液的粒径分布和Zeta-电位的影响,结果表明,随着胶原蛋白浓度从0.02 wt%增加到1.5 wt%,有利于形成较小的液滴,并且随着浓度的增大,有利于皮克林乳液的稳定性;随着胶原蛋白浓度的增加,皮克林乳液的Zeta-电位增加。随着pH值的增加,乳液平均粒径先增大后减小,Zeta电位不断降低,pH值对皮克林乳状液的物理性质产生了一定的影响。酸溶性胶原蛋白的浓度显著影响皮克林乳剂的稳定性,结果表明,在储存14 d后,当浓度低于0.5 wt%时,皮克林乳液发生相分离。随着酸溶性胶原蛋白浓度的增加（从0.02 wt%到1.5 wt%）,皮克林乳状液的稳定性得到改善。流变学结果表明,随着胶原蛋白浓度的增加,乳液的储能模量（G′）不变,损耗模量（G″）增大,损耗模量（G″）大于储存模量（G′）,表明该皮克林乳液更偏向于黏弹性液体。储存7 d后,葛根素和槲皮素在皮克林乳液中的保留率较好,表明胶原蛋白颗粒稳定的皮克林乳液在包封植物多酚方面具有优势。皮克林乳液抑制脂质氧化结果表明,以胶原蛋白稳定添加葛根素和槲皮素的皮克林乳液能够有效抑制皮克林乳液的脂质氧化。本研究也探究了皮克林乳液对ACE抑制作用,两种皮克林乳液对ACE有一定的抑制作用。

关键词：海参胶原蛋白葛根素槲皮素相互作用皮克林乳液

培育行动对单项冠军专利国际化的影响——基于准自然实验的政策评价研究

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科研管理 2024年第10期 152-159页

作者：张米尔张霖霖任腾飞大连理工大学经济管理学院

单项冠军是制造业细分领域的全球领先者，专利国际化对单项冠军拓展海外市场、抵御专利风险至关重要；单项冠军培育行动是实现制造强国战略的重大举措，评价培育行动对专利国际化的影响将为政策优化提供决策依据。为排除其他因素对培育... 详细信息

单项冠军是制造业细分领域的全球领先者，专利国际化对单项冠军拓展海外市场、抵御专利风险至关重要；单项冠军培育行动是实现制造强国战略的重大举措，评价培育行动对专利国际化的影响将为政策优化提供决策依据。为排除其他因素对培育行动评价的干扰，选择实验组和对照组构建准自然实验，汇集梳理样本企业的专利国际化数据，开展培育行动实施效果评价。研究结果表明，培育行动引导单项冠军重视专利国际化，对国际专利申请产生显著促进作用，但未能显著促进国际专利申请进入国家阶段，国际专利申请平均进入国家数呈现下降趋势；单项冠军的专利国际化质量还不高，尚未充分利用PCT体系优势布局国际专利，有必要以平均进入国家数跟踪评价单项冠军的专利国际化。因此，建议优化培育行动复核机制，将专利国际化列为资格复核的重要指标，鞭策单项冠军提升专利国际化质量，利用培育行动的政策支持，加快完善国际专利布局，以提升抵御海外市场专利风险的专利实力。

关键词：单项冠军培育行动专利国际化准自然实验政策评价