MR评价酪氨酸酶基因在人胚胎肾293细胞表达的实验研究

作     者：元建鹏 梁碧玲 钟镜联 谢榜昆 张卫东 张琳 

作者机构：中山大学附属第二医院放射科广州510120 

出 版 物：《中华放射学杂志》 (Chinese Journal of Radiology)

年 卷 期：2004年第38卷第6期

页      面：605-610页

核心收录：

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 100207[医学-影像医学与核医学] 1002[医学-临床医学] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金：广东省医学科学技术基金资助项目 (项目编号 :A2 0 0 3 2 14 ) 广东省自然科学基金 (A3 170 9) 

主　　题：MR评价 酪氨酸酶基因 人胚胎肾 293细胞 表达 实验研究 基因治疗 

摘      要：目的 以酪氨酸酶基因作为报告基因转染人胚胎肾 (HEK) 2 93细胞 ,利用其合成大量黑色素而能被MRI检测的特性来反映基因表达的情况 ,以探索MRI评价体外细胞基因表达的方法。方法 以脂质体将含酪氨酸酶基因完全cDNA的pcDNA3tyr质粒转染到HEK2 93细胞 ,以MRT1W、T1W/SPIR(selectivepartialinversionrecovery)、T2 W序列扫描转染细胞 ,观察表达的黑色素的MR信号。应用Fontana染色和电子显微镜检测黑色素的合成 ,逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)检测酪氨酸酶基因的cDNA片段 ,以进一步验证酪氨酸酶基因的转染与表达。结果 (1)pcDNA3tyr质粒转染进入HEK2 93细胞并在其中表达生成黑色素 ,转染 5、10、2 0 μg质粒的 10 6个细胞内生成的黑色素能够被MRI检测到并在MRT1WI、T1WI/SPIR、T2 WI呈高信号 ,转染质粒量越大 ,MRI信号强度越高。 6 2 5× 10 4个转染有 2 0 μg质粒的HEK2 93细胞仍可检测到高信号。 (2 )Fontana染色法检测到HEK2 93细胞内的黑色素颗粒 ;(3)电子显微镜观察到在HEK2 93细胞胞质内有较多的黑色素颗粒及黑色素前体 ;(4 )采用RT PCR方法检测到转染的HEK2 93细胞含酪氨酸酶基因的cDNA片段。结论 MRI能够检测到HEK2 93细胞内由外源基因表达合成的黑色素 ,说明影像学与分子生物学技术结合可以?