硒代蛋氨酸通过NF-κB和MAPK通路抑制P.g-LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS和COX-2表达

作     者：张福 周平 向锋 汪春艳 李镭 ZHANG Fu;ZHOU Ping;XIANG Feng;WANG Chunyan;LI Lei

作者机构：来凤县人民医院口腔科湖北恩施445799 湖北省口腔基础医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地口腔生物医学教育部重点实验室(武汉大学)湖北武汉430079 武汉大学口腔医院湖北武汉430079 

出 版 物：《口腔医学研究》 (Journal of Oral Science Research)

年 卷 期：2023年第39卷第3期

页      面：236-241页

学科分类：1003[医学-口腔医学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学] 

基　　金：湖北省自然科学基金(编号:2020CFB455)恩施州科技计划(编号:JCY2019000018) 

主　　题：硒代蛋氨酸 牙龈卟啉单胞菌脂多糖 巨噬细胞 NF-κB信号通路 

摘      要：目的:探讨硒代蛋氨酸(Selenomethionine,SeMet)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)诱导的RAW264.7细胞的作用和机制。方法:使用P.g-LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7体外构建炎症细胞模型,CCK-8法检测不同浓度SeMet对RAW264.7细胞活性的影响。以不同浓度的SeMet(10、25、50μmol/L)干预细胞1 h后,再使用P.g-LPS诱导细胞24 h。RT-PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)相关基因表达,ELISA法检测iNOS和COX-2相关蛋白分泌情况。Western blot检测NF-κB和MAPK信号通路相关蛋白表达情况。结果:浓度低于50μmol/L的SeMet对RAW264.7细胞活性没有显著影响。对RAW264.7使用SeMet预处理后,SeMet明显抑制P.g-LPS诱导的iNOS和COX-2相关基因表达和蛋白分泌增加,其作用与SeMet浓度有关,浓度越高,抑制作用越明显。其作用机制是通过抑制NF-κB通路的p65向核内转移,以及抑制MAPK通路的p38、ERK和JNK磷酸化发挥作用,并且其抑制作用呈浓度依赖性。结论:SeMet抑制P.g-LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS和COX-2表达,其作用机制可能与SeMet抑制NF-κB p65核内转移和抑制MAPK通路p38、ERK和JNK的磷酸化有关。