布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白VceC对山羊滋养层细胞内质网应激和性腺激素分泌的影响
The Influence of Brucella Type IV Secretes System Effector Protein VceC on Endoplasmic Reticulum Stress and Gonadal Hormone Secretory in Goat Trophoblast Cells作者机构:西北农林科技大学动物医学院农业农村部动物生物技术重点实验室杨凌712100
出 版 物:《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)
年 卷 期:2023年第54卷第3期
页 面:1210-1220页
核心收录:
学科分类:090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:国家自然科学基金(31672584) 陕西省科技统筹创新工程计划项目(2016TZC-N-13-5)
主 题:布鲁氏菌 IV型分泌系统 VceC效应蛋白 山羊滋养层细胞 内质网应激 性腺激素
摘 要:旨在研究布鲁氏菌IV型分泌系统效应分子VceC对山羊滋养层细胞(GTC)内质网应激及性腺激素分泌的影响,为揭示其在布鲁氏菌感染宿主细胞中的作用,阐明布鲁氏菌胞内生存和引起动物流产的机制提供重要依据。本研究通过构建VceC的真核表达载体pEGFP-C1-VceC并转染GTC,Western blot检测内质网应激标志性分子GRP78和CHOP蛋白表达量变化,qRT-PCR和Western blot进一步检测未折叠蛋白反应(UPR)信号通路相关分子;ELISA检测细胞培养上清液的孕酮和雌激素的浓度变化。结果表明,成功构建了VceC真核表达载体pEGFP-C1-VceC,转染GTC后,12和24 h GRP78蛋白表达均显著升高(P0.05),Western blot检测IRE1蛋白的表达在转染12 h后显著升高(P0.05)。证明布鲁氏菌VceC不仅能通过激活UPR中的IRE1通路从而激发GTC的内质网应激反应,还能改变GTC中孕酮/雌激素的比值。