猪圆环病毒4型实时荧光RAA检测方法的建立
Establishment of a real-time fluorescence RAA detection method forporcine circovirus type 4作者机构:温州大学病毒学研究所浙江温州325035 广西动物疫病预防控制中心广西南宁530004
出 版 物:《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)
年 卷 期:2023年第43卷第3期
页 面:442-447页
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:温州市基金资助项目(N20180010 N20190005)
摘 要:为快速检测猪圆环病毒4型(PCV4),本研究根据PCV4的Cap基因片段保守区设计引物和探针,建立了PCV4重组酶介导核酸等温扩增荧光法(RAA),并应用该方法对40份猪组织样品进行检测。结果表明,该方法可在20 min内,42℃恒温条件下特异性检测出PCV4,以猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等病毒核酸为模板进行反应的扩增结果均为阴性;最低检出限至7.42×10^(1)拷贝/μL,灵敏度较高。利用建立的RAA检测方法和常规PCR法分别对猪组织样本进行检测,均未检出,表明当前猪场流行率较低。综上所述,本研究建立的PCV4实时荧光RAA检测方法快速简便、特异性强、灵敏度较高,可应用于PCV4的临床筛查与流行病学研究。