靶向胃癌干细胞单克隆抗体2C12的鉴定及功能研究

作     者：张弢 李建周 马小军 郑蕊 舒雄 王淼舟 ZHANG Tao;LI Jianzhou;MA Xiaojun;ZHENG Rui;SHU Xiong;WANG Miaozhou

作者机构：西宁市第二人民医院青海西宁810003 北京积水潭医院/北京市创伤骨科研究所北京100035 青海大学附属医院青海西宁810012 

出 版 物：《现代肿瘤医学》 (Journal of Modern Oncology)

年 卷 期：2023年第31卷第8期

页      面：1386-1390页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：青海省科技厅应用基础研究项目(编号:2020-ZJ-779) 

主　　题：胃癌干细胞 单克隆抗体 成球能力 侵袭能力 

摘      要：目的:研究胃癌干细胞的功能性单克隆抗体2C12体外功能实验,为胃癌干细胞的靶向治疗提供候选单抗药物。方法:以胃癌细胞系SNU-5为细胞模型,流式细胞术检测其亲本细胞和通过无血清悬浮培养的球体细胞中2C12+细胞的表达水平,双色细胞免疫荧光检测单抗2C12和CD90识别的抗原在SNU-5细胞中的表达情况。流式细胞术分选SNU-5细胞中2C12+和2C12-细胞,采用无血清悬浮培养成球实验和Transwell小室法分别检测其自我更新能力和侵袭能力。用单抗2C12处理SNU-5的球体细胞后,检测其对SNU-5的球体细胞自我更新能力和侵袭能力的影响。结果:2C12+细胞在SNU-5的球体细胞中的表达水平明显高于亲本细胞。免疫荧光结果显示单抗2C12识别的抗原分子能与CD90在SNU-5细胞上共定位。流式细胞术分选结果表明SNU-5细胞中2C12+细胞成球数明显高于2C12-细胞(103.3±9.07 vs 50.67±5.86)(P0.01),侵袭能力也明显较高(209.3±12.9 vs 99.0±3.61)(P0.01)。对2C12单抗的体外功能研究发现,不同浓度的单抗2C12(0μg/mL、20μg/mL、40μg/mL)能显著抑制SNU-5的球体细胞的成球能力(122.0±5.66、83.0±5.66、59.0±4.24),抑制率达到31.97%和51.64%,同时侵袭能力也显著降低(178.0±8.49、106.5±5.0、78.0±2.83),抑制率达到40.17%和56.18%。结论:单抗2C12是一株抗胃癌干细胞的功能性单抗,能够显著抑制胃癌干细胞的干性相关特征,为胃癌干细胞靶向治疗的候选抗体药物。