lncRNA SMAD5-AS1在肺腺癌细胞中的表达及其通过Wnt/β-catenin通路对癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响

作     者：柯有力 罗东 刘旭 Ke Youli;Luo Dong;Liu Xu

作者机构：华中科技大学同济医学院附属武汉市中西医结合医院武汉市第一医院胸外科武汉430033 华中科技大学同济医学院附属武汉市中西医结合医院武汉市第一医院呼吸及危重症医学科武汉430033 

出 版 物：《华中科技大学学报（医学版）》 (Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong)

年 卷 期：2023年第52卷第1期

页      面：7-13页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：武汉市卫生健康委科研项目(No.WX21D24) 

主　　题：长链非编码RNA SMAD家族成员5反义RNA1 肺腺癌 增殖 迁移 侵袭 Wnt/β-catenin通路 

摘      要：目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)SMAD家族成员5反义RNA1(SMAD5-AS1)在肺腺癌(LUAD)中的表达及其对LUAD细胞恶性生物学行为的影响,并分析其潜在机制。方法通过生物信息学网站对LUAD组织中lncRNA SMAD5-AS1的表达进行分析;应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测72例LUAD组织与邻近正常组织以及人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)与人LUAD细胞(SPC-A-1、A549、H1299、LTEP-a-2)中lncRNA SMAD5-AS1表达水平。体外培养对数生长期的SPC-A-1和H1299细胞,分为SPC-A-1对照组(SPC-A-1-Ctr组)、SPC-A-1+sh-NC组、SPC-A-1+sh-SMAD5-AS1组、H1299对照组(H1299-Ctr组)、H1299+LV5-NC组、H1299+LV5-SMAD5-AS1组。采用携带lncRNA SMAD5-AS1敲除的短发夹RNA(sh-SMAD5-AS1)和lncRNA SMAD5-AS1过表达的重组质粒(LV5-SMAD5-AS1)及相应空载体的重组慢病毒转染细胞,qRT-PCR验证转染效率;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)测定细胞增殖活性;划痕愈合实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;Western blot检测细胞上皮间质转化(EMT)和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路相关蛋白[E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、β-catenin]的表达。结果lncRNA SMAD5-AS1在LUAD组织和细胞中呈高表达(均P0.05);敲低lncRNA SMAD5-AS1表达后,SPC-A-1细胞的增殖活性、侵袭和迁移能力及N-cadherin、Vimentin和细胞核β-catenin蛋白水平显著降低(均P0.05),E-cadherin和GSK-3β蛋白水平显著升高(均P0.05);过表达lncRNA SMAD5-AS1后,H1299细胞的增殖活性、侵袭和迁移能力及N-cadherin、Vimentin和细胞核β-catenin蛋白水平显著升高(均P0.05),E-cadherin和GSK-3β蛋白水平显著降低(均P0.05)。结论lncRNA SMAD5-AS1在LUAD中高表达,其可能通过激活Wnt/β-catenin通路促进LUAD细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。