菟丝子对恐伤孕鼠子代学习记忆及海马m^(6)A修饰的影响

作     者：张桐 侯俊林 江煜 杨丽萍 杜志欣 刘岳轩 丁申奥 杨雪明 闫毅楠 ZHANG Tong;HOU Junlin;JIANG Yu;YANG Liping;DU Zhixin;LIU Yuexuan;DING Shenao;YANG Xueming;YAN Yinan

作者机构：河南中医药大学河南省中西医结合防治脑认知疾病工程技术研究中心郑州市中西医结合防治脑认知疾病重点实验室郑州450046 河南中医药大学第三附属医院郑州450008 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2023年第29卷第2期

页      面：104-112页

核心收录：

学科分类：100504[医学-方剂学] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100501[医学-中医基础理论] 100601[医学-中西医结合基础] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81973596) 河南省科技攻关项目(212102310341)。 

主　　题：菟丝子 恐伤肾 学习记忆 海马 N6-甲基腺嘌呤(m^(6)A) 

摘      要：目的:观察菟丝子对恐伤孕鼠所产子代学习记忆能力及海马N6-甲基腺苷(m^(6)A)相关修饰酶和m^(6)A总水平的影响。方法:将45只孕鼠随机分为空白组、模型组和菟丝子组。在孕1 d~孕19 d,模型组和菟丝子组采用旁观电击法造模,菟丝子组5 g·kg^(-1)·d^(-1)菟丝子水煎剂灌胃,其余2组等量纯净水灌胃处理,所产仔鼠延续母代分组。仔鼠于21 d龄进行水迷宫实验观察行为学改变;采用透射电镜观察仔鼠海马神经元发育情况;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)、免疫组化法(IHC)分别检测仔鼠海马甲基转移酶样蛋白3(METTL3)、甲基转移酶样蛋白14(METTL14)、Wilms瘤1相关蛋白(WTAP)、脂肪量和肥胖相关蛋白(FTO)、Alk B同源蛋白5(ALKBH5)mRNA及蛋白表达水平;采用高效液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)检测仔鼠海马m^(6)A总含量。结果:与空白组比较,模型组仔鼠平均潜伏期延长,进入目标象限次数、目标象限停留时间及穿越平台次数均显著减少(P0.01);海马CA1、CA3神经元结构损伤严重,线粒体肿胀,内质网扩张,部分突触结构模糊,数量较少;METTL3、METTL14、FTO、ALKBH5表达水平下降,m^(6)A总水平明显下降(P0.05,P0.01)。与模型组比较,菟丝子组仔鼠平均潜伏期缩短,进入目标象限次数、目标象限停留时间及穿越平台次数均显著增加(P0.01);海马CA1、CA3神经元损伤程度减轻,线粒体、内质网结构较好,突触结构清晰、完整,分布密集;METTL3、METTL14、FTO表达水平上升,m^(6)A总水平明显上升(P0.05,P0.01)。结论:菟丝子能够有效改善孕期恐伤肾所致的子代学习记忆能力下降,保护海马神经元,上调海马METTL3、METTL14、FTO表达水平及m^(6)A总水平。