维生素C对LPS诱导脓毒症肾损伤的保护作用及其机制研究

作     者：徐文筠 毛恩强 陈尔真 卞晓岚 何娟 Xu Wenyun;Mao Enqiang;Chen Erzhen;Bian Xiaolan;He Juan

作者机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院药剂科上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院急诊科上海200025 

出 版 物：《中华危重病急救医学》 (Chinese Critical Care Medicine)

年 卷 期：2022年第34卷第12期

页      面：1291-1295页

核心收录：

学科分类：100218[医学-急诊医学] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：上海市卫生健康委员会"医苑新星"青年医学人才基金(RC20200120)。 

主　　题：脓毒症 肾损伤 维生素C 坏死性炎症 

摘      要：目的探讨维生素C对脂多糖(LPS)所致脓毒症肾损伤的保护作用及机制。方法采用10 mg/L LPS分别诱导肾小管上皮HK-2细胞8 h和12 h,之后分别加入0.5 mmol/L与1 mmol/L维生素C继续作用,使用细胞增殖与毒性检测试剂(CCK-8)检测细胞生存率,以确定后续的合适实验条件。将细胞分为空白对照组、LPS组和LPS+维生素C组(LPS+VC组)。采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测各组HK-2细胞坏死关键蛋白〔磷酸化混合谱系激酶结构域样蛋白(p-MLKL)、磷酸化受体相互作用蛋白激酶3(p-RIPK3)〕的蛋白表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组HK-2细胞炎症因子〔白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)〕水平,比较各组间上述指标的差异。结果CCK-8检测结果显示,1 mmol/L维生素C能使LPS诱导12 h后的HK-2细胞生存率提高至86%,故选用该条件进行后续实验。LPS诱导HK-2细胞12 h后,p-MLKL和p-RIPK3的蛋白表达均显著高于空白对照组,IL-1β、TNF-α水平也均显著高于空白对照组〔IL-1β(ng/L):23.2±1.4比12.8±3.9,TNF-α(ng/L):36.4±3.9比11.6±1.8,均P0.05〕,提示细胞坏死与炎症反应同时存在;而与LPS组比较,1 mmol/L维生素C可明显降低p-MLKL和p-RIPK3的蛋白表达,也能明显降低IL-1β与TNF-α水平〔IL-1β(ng/L):19.8±0.7比23.2±1.4,TNF-α(ng/L):17.4±5.8比36.4±3.9,均P0.05〕。结论维生素C可缓解LPS诱导的HK-2细胞损伤,降低坏死关键蛋白与炎症因子的表达。