Amaxa Nucleofector^(TM)核转染仪转染白血病细胞株L1210

作     者：杨阿碰 马洁娴 秦文明 谢彦晖 金由辛 YANG A-Peng;MA Jie-Xian;QIN Wen-Ming;XIE Yan-Hui;JIN You-Xin

作者机构：复旦大学华山医院血液科上海200040 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞研究所上海200031 

出 版 物：《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期：2010年第18卷第6期

页      面：1604-1608页

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：L1210 EGFP 核转染 脂质体转染 

摘      要：慢性淋巴细胞白血病细胞株L1210是广泛运用于白血病发病机制以及化疗药物研究的细胞模型,但该细胞株与其它悬浮细胞株一样,存在着转染效率低的难题。本研究旨在探讨如何提高L1210细胞株的转染效率。应用报告基因pEGFP并通过Amaxa NucleofectorTM核转染仪的几种转染预设模式转染悬浮L1210细胞,与脂质体Lipofectamine 2000转染进行对比,在荧光倒置显微镜下观察、使用流式细胞术检测转染效率,用台盼蓝排斥实验比较存活率。结果表明:使用核转染仪进行转染在L1210细胞中获得了很高的转染效率,且在一样细胞密度(2×106/ml)和质粒量(10μg)条件下,在24小时后进行比较,核转染仪预设模式A-20转染效率达(61.6%),明显高于其它模式(S-18、T-20),存活率可达50.5%;脂质体转染24小时细胞存活率为88%,但转染效率极低(1%)。结论:核转染仪转染L1210的效率明显高于脂质体转染方案,其转染效率最高可达61.6%,存活率可达50.5%,此结果可满足科研工作需求。