利用SCAR分子标记鉴别香菇双单杂交后代

作     者：吴圣进 陈雪凤 刘增亮 张雯龙 WU Sheng-jin;CHEN Xue-feng;LIU Zeng-liang;ZHANG Wen-long

作者机构：广西农业科学院微生物研究所广西南宁530007 

出 版 物：《南方农业学报》 (Journal of Southern Agriculture)

年 卷 期：2022年第53卷第10期

页      面：2868-2875页

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090202[农学-蔬菜学] 

基　　金：广西重点研发计划项目(桂科AB21196069) 国家现代农业产业技术体系广西食用菌创新团队建设专项(Nycytxgxcxtd-2021-07-02) 广西特色作物试验站建设专项(TS202115) 广西农业科学院基本科研业务专项(桂农科2021YT096)。 

主　　题：香菇 SCAR 双单杂交 杂合子 分子鉴别 

摘      要：【目的】利用SCAR分子标记鉴别香菇双单杂交后代,为香菇分子辅助育种提供技术支撑。【方法】通过ISSR分析获得标识供体亲本菌株YX7两个细胞核的特异性条带,根据特异性条带序列设计SCAR引物,对菌株YX7为供体和菌株808孢子单核体为受体杂交获得的40个杂交菌株进行SCAR-PCR鉴别,并采用传统镜检和拮抗测试方法进行验证。【结果】筛选出分别标识供体菌株YX7两个细胞核核型的特异性条带a和b,据此设计的SCAR引物PA和PB分别对供体菌株YX7的2个不同细胞核具有特异性扩增作用。SCAR-PCR鉴定结果显示,40个待测菌株中,27个菌株为杂合子,其中19个菌株具有a条带标识核型,8个菌株具有b条带标识核型;13个菌株为非杂合子,其中11个菌株同时具有条带a和b标识的两个核型,是菌株YX7本身,另外2个菌株两种核型均未被检测出,属于菌株808的孢子单核体。传统方法验证结果与SCAR分子标记鉴定结果完全一致。与传统方法相比,SCAR标记方法更简便高效、结果更稳定可靠,并可通过核型标识进一步将杂合子分为两组。【结论】SCAR分子标记能高效、全面和精准鉴别香菇双单杂交菌株的杂合子和非杂合子,可应用于香菇杂交分子辅助育种和遗传分析。