模拟酶解优化鸽血红蛋白抗氧化肽酶法制备

作     者：力俊琛 高昕悦 江晨怡 杨云顺 赛买提·艾则孜 刘雅娜 巴吐尔·阿不力克木 LI Jun-chen;GAO Xin-yue;JIANG Chen-yi;YANG Yun-shun;Saimaiti Aizeizi;LIU Ya-na;Batuer Abulikemu

作者机构：新疆农业大学食品科学与药学学院新疆乌鲁木齐830052 

出 版 物：《食品研究与开发》 (Food Research and Development)

年 卷 期：2023年第44卷第2期

页      面：108-115页

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083203[工学-农产品加工及贮藏工程] 

基　　金：新疆维吾尔自治区科技成果转化示范专项(2020C005) 

主　　题：鸽血红蛋白 抗氧化肽 模拟酶解 响应面分析法 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 

摘      要：以鸽血红蛋白为原材料,采用在线数据库ExPASy Peptide Cutter中的蛋白酶模拟酶解,通过生物信息学工具筛选多肽潜在的生物活性、溶解性、毒性和致敏性,由此预测最适宜制备鸽血红蛋白源抗氧化肽的蛋白酶。设置不同的酶解时间、酶添加量和酶解温度作为单因素,探究不同酶解条件对酶解产物水解度和DPPH自由基清除率的影响。在单因素试验的基础上,通过响应面法优化试验,探究酶解法制备鸽血红蛋白抗氧化肽的最优工艺条件。结果表明,蛋白酶K为虚拟筛选出的最佳蛋白酶,最佳的制备鸽血红蛋白抗氧化肽的工艺为鸽血红蛋白浓度1 g/100 mL、pH8、酶解时间3 h、酶添加量415.54 U/g、酶解温度65℃。在此条件下,通过验证试验得出响应值DPPH自由基清除率为(33.21±0.68)%,与预测值相差较小,故而此条件为最优工艺。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验,发现最优工艺条件下鸽血红蛋白酶解后目的条带消失,进一步验证该方法为酶解鸽血红蛋白源抗氧化肽的最优工艺。