miR-34a通过靶向抑制Notch信号通路减轻糖尿病肾病小鼠的足细胞损伤

作     者：王欢岚 刘红 张燕敏 陈伟栋 WANG Huanlan;LIU Hong;ZHANG Yanmin;CHEN Weidong

作者机构：武汉市第一医院(武汉市中西医结合医院)肾内科湖北武汉430022 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2022年第42卷第12期

页      面：1839-1845页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：湖北省卫生健康委员会中医药科研项目(ZY2019Q024) 

主　　题：糖尿病肾病 miR-34a Notch信号通路 足细胞 凋亡 

摘      要：目的探讨miR-34a介导Notch信号通路对糖尿病肾病(DN)足细胞损伤及凋亡的影响。方法体外实验:通过RT-PCR法检测高糖(30 mmol/L)环境下足细胞中miR-34a表达水平,构建miR-34a过表达足细胞系(miR-34a组)及其阴性对照(miR-NC组),使用荧光素酶实验验证miR-34a与Notch 1的靶向关系,构建Notch 1过表达足细胞系(Notch 1组)和miR-34a、Notch 1均表达升高细胞系(miR-34+Notch 1组);采用CCK-8法检测足细胞存活情况,流式细胞法检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞凋亡关蛋白水平。体内实验:通过高脂饮食和链脲佐菌素建立DN小鼠模型并分为模型组、miR-34a组(n=15/组),另选15只不做干预小鼠为对照组,miR-34a组和模型组小鼠分别尾静脉注射agomir-34a[80 mg/(kg·d)]、agomir-NC[80 mg/(kg·d)],连续注射3 d,4周后,HE染色、TUNEL法分别观察肾组织病理、凋亡情况,Western blot检测肾组织凋亡相关蛋白和Notch 1蛋白表达水平。结果高糖环境下足细胞中miR-34a表达水平低于正常糖诱导下足细胞和高渗透压下作用下的足细胞(P0.05);miR-34a组足细胞的A值高于miR-NC组(P0.05),而细胞凋亡率和caspase-3、caspase-9、Bax/Bcl-2蛋白水平均低于miR-NC组(P0.05);Notch 1组足细胞的A值低于miR-NC组(P0.05),而细胞凋亡率和caspase-3、caspase-9、Bax/Bcl-2蛋白水平均高于miR-NC组(P0.05);miR-34a+Notch 1组足细胞的A值低于miR-34a组(P0.05),而细胞凋亡率和caspase-3、caspase-9、Bax/Bcl-2蛋白水平均高于miR-34a组(P0.05)。对照组小鼠肾组织结构清晰完整,模型组小鼠肾小球肿胀、体积增大,miR-34a组小鼠肾组织病变程度得到改善;模型组小鼠肾组织miR-34a表达水平低于对照组(P0.05),miR-34a组小鼠的肾组织miR-34a表达水平高于对照组(P0.05);模型组小鼠肾组织凋亡指数和caspase-3、caspase-9、Notch 1蛋白水平高于对照组(P0.05),miR-34a组小鼠肾组织凋亡指数和caspase-3、caspase-9、Notch 1蛋白水平低于模型组(P0.05)。结论miR-34a可通过靶向作用Notch 1改善DN足细胞损伤和凋亡。