siRNA介导的HPV16E6/E7基因沉默对宫颈癌SiHa增殖及凋亡的影响

作     者：王平 刘珊 程波 吴西钊 武迪 许琳 石建玲 段恋 孙锁柱 WANG Ping;LIU Shan;CHENG Bo;WU Xi-zhao;WU Di;XU Lin;SHI Jian-ling;DUAN Lian;SUN Suo-zhu;Hebei North University;Department of Pathology,General Hospital of the Second Artillery,PLA;Department of Pathology,People’s Hospital of Da Xing District

作者机构：河北北方学院病理学与病理生理学系河北张家口075000 第二炮兵总医院病理科北京100088 大兴区人民医院病理科北京102600 

出 版 物：《诊断病理学杂志》 (Chinese Journal of Diagnostic Pathology)

年 卷 期：2015年第22卷第12期

页      面：781-786页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：siRNA HPV 细胞增殖与凋亡 SiHa细胞 

摘      要：目的探讨小干扰RNA(siRNA)介导的人乳头状瘤病毒16型(HPV16)E6/E7基因沉默对宫颈癌Si Ha细胞增殖及凋亡的影响。方法设计靶向HPV16 E6/E7基因启动子区的siRNA序列,构建质粒转染Si Ha细胞,筛选稳定沉默E6/E7基因的细胞系。用QT-PCR和RT-PCR检测细胞E6/E7基因mRNA的变化、Western blot检测细胞E6/E7蛋白变化;利用MTT、RT-PCR、免疫组化法检测细胞增殖情况,Tunel检测细胞的凋亡情况。结果成功构建E6/E7基因稳定沉默的细胞株,其mRNA与蛋白沉降效率明显。MTT及Ki-67表达显示细胞增殖活性降低;Tunel显示沉默细胞凋亡增加。结论 siRNA技术可以成功诱导HPV16型E6/E7基因沉默,从而影响癌细胞的生长、增殖和凋亡。