四种胞外基质支持人胚胎干细胞的生长:效果有差异吗?

作     者：胡智兴 罗敏 周轶平 梁道明 

作者机构：昆明医学院药理学教研室云南省昆明市650031 昆明医学院云南省生物医学工程中心云南省昆明市650031 昆明医学院云南省天然药物药理重点实验室云南省昆明市650031 昆明医学院第二附属医院云南省昆明市650031 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2010年第14卷第6期

页      面：1027-1030页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：云南省科技厅-昆明医学院应用基础研究联合专项基金资助项目(2007C0012R 2007C0044R) 云南省自然科学基金(2005C0013R)~~ 

主　　题：胞外基质 自我更新 生长 整合素 人胚胎干细胞 

摘      要：背景:胞外基质在维持人胚胎干细胞的自我更新和未分化状态方面具有重要作用,建立无血清无饲养层、成分明确的人胚胎干细胞培养系统是人胚胎干细胞运用于临床移植研究的前提。目的:比较4种胞外基质对于维持人胚胎干细胞生长的效果差异。方法:常规复苏人胚胎干细胞株BG02,设立4组,分别将人胚胎干细胞转至预铺有纤粘连蛋白、Ⅳ型胶原、Matrigel、层粘连蛋白的培养板上,均在含bFGF,TGFβ及ITS无血清培养基中培养。测定细胞集落贴壁率及分化率,流式细胞仪检测人胚胎干细胞特异性分子标志Oct-4及Nanog的表达,RT-PCR检测胞外基质受体的表达。结果与结论:与纤粘连蛋白组、Ⅳ型胶原组比较,Matrigel组和层粘连蛋白组人胚胎干细胞集落的贴壁率均明显增加(P0.05)。Matrigel组、层粘连蛋白组人胚胎干细胞高表达整合素受体integrinα5,integrinα6和integrinβ1;而纤粘连蛋白组、Ⅳ型胶原组3种整合素受体的表达均明显降低。提示Matrigel和层粘连蛋白可以较好支持人胚胎干细胞在无饲养层体系生长,而纤粘连蛋白和Ⅳ型胶原无法维持人胚胎干细胞的未分化状态;人胚胎干细胞integrin受体家族激活状态的不同,可能是不同胞外基质对于维持人胚胎干细胞自我更新产生差异的原因之一。