抑制c-Kit和Cx43对膀胱收缩功能的影响及其作用机制的研究

作     者：谭明辉 欧阳松 钱彪 郝雨 轩留明 孙鹏 张永强 王勤章 Tan Minghui;Ouyang Song;Qian Biao;Hao Yu;Xuan Liuming;Sun Peng;Zhang Yongqiang;Wang Qinzhang

作者机构：石河子大学第一附属医院泌尿外科石河子832000 

出 版 物：《安徽医科大学学报》 (Acta Universitatis Medicinalis Anhui)

年 卷 期：2022年第57卷第12期

页      面：1941-1947页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(编号:81960147) 

主　　题：逼尿肌活动低下 Cajal间质细胞 缝隙链接蛋白43 超微结构 豚鼠 

摘      要：目的 通过抑制膀胱Cajal间质细胞(ICCs)上的缝隙链接蛋白43(Cx43)与酪氨酸激酶受体蛋白(c-Kit)探究对膀胱收缩功能的影响。方法 80只雄性豚鼠随机分为空白对照组、Glivec(c-Kit抑制剂)组、Gap27 (Cx43抑制剂)组和Glivec+Gap27组。4组于每日上午灌注生理盐水、Glivec、Gap 27、Glivec+Gap 27,持续灌注2个月。于灌注2个月后行尿流动力学检测造模是否成功,收取新鲜膀胱组织,行体外肌条实验检测各组的肌肉收缩功能;免疫荧光检测c-Kit与Cx43在ICCs细胞上的表达;qRT-PCR和Western blot法检测膀胱组织中c-Kit与Cx43的表达;电镜观察膀胱平滑肌超微结构变化。结果 尿动力学显示实验组较空白对照组膀胱顺应性增加(P0.05);Glivec+Gap27组膀胱顺应性比Glivec组和Gap27组增加(P0.01)。体外肌条实验显示实验组的膀胱肌条收缩频率和张力较空白对照组降低(P0.05),实验组给予乙酰胆碱(ACH)后与对照组相比肌条收缩减弱(P0.05)。免疫荧光显示c-Kit与Cx43在ICCs细胞上共表达。qRT-PCR和Western blot提示抑制c-Kit后,膀胱组织中的Cx43蛋白表达水平、基因表达水平低于空白对照组(P0.05);抑制Cx43后,膀胱组织中的c-Kit蛋白表达水平、基因表达水平低于空白对照组(P0.05)。电镜显示同时抑制c-Kit与Cx43后膀胱平滑肌线粒体结构破坏。结论 Cx43在膀胱ICCs上表达,二者可能共同参与调控膀胱收缩功能。Cx43和c-Kit的降低可能破坏了膀胱平滑肌的线粒体,影响其功能,进而影响膀胱收缩功能。